文档介绍:
纸层析的实验报告
纸层析的试验报告篇一:纸层析法分别氨基酸试验报告 前言
纸层析法 纸层析法又称纸色谱法,是目前广泛应用的一种分别技术。。
(3)Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离。
(4)在必须的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的构造、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。本试验利用纸层析法分别氨基酸。材料与方法
三、试验装置与试剂
(1)氨基酸标准液(1mg/ml)
亮氨酸、甘氨酸和脯氨酸标准液。
(2)80%甲醇
(3)%茚三酮丙酮溶液
(4)氨基酸混合液(每种氨基酸500mg/mL)
(5)正丁醇
试验仪器
(1)新华滤纸×1
(2)造就皿×1
(3)电热鼓风枯燥箱×1
(4)吹风机×1
(5)毛细管×4
〔6〕针、线、尺×1
〔7〕钟罩(高约430mm,直径约290mm,具磨口塞)×1
试验操作
(1)滤纸
选用国产新华 1号滤纸, 6cm×7cm。在距滤纸2cm处划线,用
铅笔在线上标上四个点作为点样位子〔留出缝线空间〕。
〔2〕点样
点样要适宜,样品点的太浓,斑点易扩散或拉长,以致分别不清。用毛细管吸取氨基酸样品,与滤纸垂直方向轻轻碰触点样处的中心,这时样品就自动流出。,点样过程中必需在第一滴样品干后再点其次滴,为使样品加速枯燥,可用吹风机吹干,但要留意温度不行过高,以免氨基酸破坏,影响定量结果。 将点好样品的滤纸两侧比齐,用线缝好,揉成筒状。留意缝线处纸的两边不要接触。幸免由于毛细管现象使溶剂沿两边移动特殊快而造成溶剂前沿不齐,影响Rf值。
(3)展层
将揉成圆筒状的滤纸放入造就皿内 (留意滤纸不要碰皿壁),当溶剂展层至距离纸的上沿约1cm时,取出滤纸,马上用铅笔标出溶剂前沿位置。
酸溶剂系统:
正丁醇: 80%甲酸:水=15:3:2(体积比),茚三酮2ml。温度25℃,时间1h。
留意:运用的溶剂系统需别致配制,并要摇匀。
〔4〕显色
待展层根本完毕后, 置65℃鼓风箱中10-20min,鼓风保温,滤纸上即显出紫红色/黄色斑点。
〔5〕Rf值的计算
篇二:氨基酸的薄层层析试验报告 试验六 纸层析法视察转氨基作用
【试验名称】:纸层析法视察转氨基作用
09救援一班  第三大组  李岚宇  20xx222336
室温:28°
〔一〕试验目的:
1、学习氨基酸纸层析的根本原理。
2、驾驭氨基酸纸层析的操作原理。
〔二〕试验原理:
转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反响,在转氨酶的催化下,氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反响称为转氨基作用。转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中,是体内氨基酸代谢的重要途径。氨基酸反响时均由专一的转氨酶催化,此酶催化氨基酸的α-氨基转移到另一α-酮基酸上。各种转氨酶的活性不同,其中肝脏的丙氨酸氨基转移酶〔ALT〕催化如下反响:
α—酮戊二酸 + 丙氨酸谷氨酸 +  丙酮酸
本试验以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物,加肝匀浆保温后,用纸层析法检查谷氨酸的出现,以证明转氨基作用。纸层析属于安排层析。以滤纸为支持物,滤纸纤维与水亲合力强,水被吸附在滤纸的纤维素的纤维之间形成固定相。有机溶剂与水不相溶,把预分别物质加到滤纸的一端