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微生物生理生化实验.docx

上传人:秋江孤影 2022/5/25 文件大小:333 KB

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微生物生理生化实验.docx

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文档介绍

文档介绍:【实验题目】微生物生理生化实验
【实验目的】了解生理生化的意义。
掌握几种常用生理生化的实验方法。
【实验器材】1、菌种:
枯草芽抱杆菌,大肠杆菌,铜绿假单胞菌,变形杆菌,产气肠杆菌2、试剂:
卢戈氏碘液、乙酰、呵噪试剂、***红试
接种:在无菌操作台上将枯草芽抱杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和铜绿假单胞菌分别划十字线接种于平板相对应部分的中心,如图2所示。
培养:将平板倒置,在28C温箱中培养两天。
观察:取出平板,观察菌苔颜色,如果出现红斑点,说明脂肪水解,为阳性反应。记录实验结果。
3、葡萄糖发酵实验培养基的配制:按照糖发酵培养基配置葡萄糖发酵培养基,分装至试管中,先将德汉氏小管中注满培养基,再把德汉氏小管倒置放入试管中,注意不要让德汉氏小管中进入空气,每组3只试管,灭菌。
接种:待培养基冷却至常温时,在无菌操作台上,取葡萄糖发酵培养基试管2支分别接入大肠杆菌和普通变形杆菌,接种后轻摇试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气
泡,第3支不接种,作为对照组。在各试管外壁上贴上标签,标签上分别标明发酵培养基的名称和所接种的细菌菌名。
培养:把接种后的试管在试管架上放好,将其放入培养箱中于28CT培养两天。
观察:观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡,并记录实验结果。
乳糖发酵实验培养基的配制:按照糖发酵培养基配置乳糖发酵培养基,分装至试管中,用胶头滴管往德汉氏小管中注满培养基,再把德汉氏小管倒置放入试管中,注意不要让德汉氏小管中进入空气,每组五只试管,灭菌。
接种:待培养基冷却至常温时,在无菌操作台上,取乳糖发酵培养基试管2支分别接入大肠杆菌和普通变形杆菌,接种后轻摇试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡。在试管外壁上贴上标签,标签上分别标明发酵培养基的名称和所接种的细菌菌名。
培养:把接种后的试管在试管架上放好,将其放入培养箱中于28CT培养两天。
观察:观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡,并记录实验结果。
呼噪实验培养基的配制:按照蛋白腺水培养基配方配制培养基,分装至试管中,每组3只,高压灭菌锅灭菌接种:待培养基冷却后,在无菌操作台上将大肠杆菌、产气肠杆菌分别接入2支蛋白月东水培养基,剩余一只试管不接种,作为空白对照,贴好标签。
培养:把接种后的试管放在试管架上放好,将其放入培养箱中于28CT培养两天。
观察:往培养后的蛋白月东水培养基内加入3-4滴乙酰,摇动数次,静置1min,待乙酰上升后,沿试管避徐徐加入2滴呵噪试剂。在乙酰和培养物之间产生红色环状物为阳性反应。观察加入试剂后试管内的颜色反应并记录实验结果。
***红实验培养基的配制:按照葡萄糖蛋白腺水培养基配方配制培养基,分装至试管中,每组3只试管,高压灭菌锅灭菌。
接种:待培养基冷却后,在无菌操作台上将大肠杆菌、产气肠杆菌分别接入
2支葡萄糖蛋白豚水培养基,剩余一只试管不接种,作为空白对照,贴好标签。
(3)培养:把接种后的试管放在试管架上,把试管连同试管架放入培养箱中丁28CT培养两天。
(4)观察:培养两天后后,将每支葡萄糖蛋白月东水培养基培养物内加入2滴***红试剂,培养基变为红色者为阳性,变为黄色者为阴性。观察试管内的颜色变化,并记录实验结果。
【实验结果】(“+”表示阳性,“一”表示阴性)
菌种
阴/阳性