文档介绍：实验一人类 X 染色质的观察及减丝分裂一、实验目的 1 、掌握观察与鉴别 X 染色质的简易方法,识别其形态特征及所在部位,为进一步研究人体染色体的畸变与疾病提供参考条件。 2、掌握动物细胞减数分裂各期的主要特征。二、实验原理 1 、正常女性的间期细胞核中紧贴核膜内缘有一个染色较深,大小约为 1微米的三角形或椭圆形小体,即X染色质,称之为巴氏小体。因为雌性哺乳动物体细胞内仅有一条 X染色体是有活性的,另一条 X染色体在遗传上是失活的,在间期细胞核中螺旋化而呈异固缩为 X染色质,但失活的 X染色质上基因并非都失去了活性,有一部分基因仍保持一定活性。因此,间期核内 X染色质的数目总是比 X染色体的数目少 1。正常女性有两条 X染色体,只有一个 X染色质;若有三条 X染色体,就会有两个 X染色质,余此类推。正常男性只有一条 X染色体,所以没有 X染色质。 2、减数分裂(meiosis )是生殖细胞特有的分裂方式,它包括两次连续的分裂过程,由于染色体只在第一次减数分裂前复制一次,结果减数分裂最终产生的 4个配子的染色体都只有原来母细胞的一半,故称为减数分裂。减数分裂过程与有丝分裂基本相同,主要区别在于第一次减数分裂的前期,这一时期历时长,染色体变化复杂,是减数分裂过程中最富特性的时期。根据染色体形态特点,可把前期分为 5个时期:细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。三、实验试剂 1、改良苯酚品红: 原液 A:取 3克碱性品红溶于 100 毫升 70% 酒精中,此液可以长期保存。原液 B:取A液10毫升加入 90毫升 5%苯酚(即石炭酸,W/V )水溶液中(2周内使用)。原液 C:取 B液55毫升加入 6毫升的冰醋酸和 6毫升 38% 的甲醛(可长期保存)。染色液:取 C液10-20 毫升,加入 90-80 毫升 45% 醋酸和克山梨醇。放置 2 周后使用,染色效果显著 2 、其他用品:牙签 60% 冰醋酸 45% 冰醋酸酒精棉球、蝗虫精巢切片标本四、实验步骤 1 、蝗虫精巢细胞减数分裂的观察减数分裂( I) 前期 I: 此期时间较长, 变化复杂, 为减数分裂的特有过程。一般又细分为以下五个不同时期: (1 )细线期: 是减数分裂的开始。此期中细胞核内的染色体呈细线状,弯曲盘绕成一团。核体积增大,核仁也较大, X 染色体呈浓染的染色质块。(2 )偶线期: 此期同源染色体进行联会。联会一般是从靠近核膜的一端开始,或在染色体全长的若干位点上同时进行联会,联会后的染色体称二价体。此期的染色体仍为较长的细线,看不出结构上的双重性, 即辨认不出两条染色单体。核仁较大,X 染色体仍呈浓染的染色质块。(3 )粗线期: 染色体明显缩短变粗,并可看出细胞中有 n 个二价体。这时联会的两条同源染色体结合得很紧密, 不易看清其中的每条染色体, 至于姐妹染色单体就更分辨不出了。此期的核仁仍然很大。需要指出的是:粗线期中同源染色体的非姐妹染色单体之间发生的局部交换,不能在显微镜下直接观察到。正如以上所述, 同源染色体的联会非常紧密, 只是根据在下一时期(双线期)看到的交叉现象,以及其它事实,判断发生了这种交换过程。(4 )双线期: 染色体进一步缩短,联会的两条同源染色体开始分离,但在交叉点上仍连在一起, 所以并不完全分离,致使二价体的形态呈 O 形、∞形