文档介绍：无菌检查操作规程无菌检查操作规程
目的
建立无菌检查标准操作规程，确保检查结果准确、可靠。
使用范围
本公司无菌产品的无菌检查职责
质量部QC依据
〈〈中国药典》通则1101
GB/-(ISO11737-2:1曲霉
的菌株及菌液制同“”。大肠埃希菌的菌液制同金黄色葡萄球菌。
薄膜过滤法：每种培养基规定接种的供试品总量按薄膜过滤法过滤，冲洗，在最后一次的冲洗液中加入小于100cfu试验菌，过滤。加硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆腺液体培
养基至滤筒内。另取一装有同体积培养基的容器，加入等量试验菌，作为对照。置规定温度下培养，培养时间不得超过5天，各试验菌同法作。
直接接种法：取符直接接种法培养基用量要求的硫乙醇酸盐
流体培养基6管，分别接入小于100cfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、生抱梭菌各2管，取符直接接种法培养基
用量要求的胰酪大豆月东液体培养基6管，分别接入小于
100cfu的枯草芽抱杆菌、白色念珠菌、黑曲霉各2管。其中1管接入每支培养基规定的供试品接种量，另1管作对照，置规定的温度培养，培养时间不得超过5天。
结果判断：与对照管比较，如供试品各容器中的试验菌均生长良好，则说明供试品的检验量在检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用能够忽略不计，照此检查方法和检查条件进行供试品的无菌检查。如供试品的任一容器中的试验菌生长微弱、缓慢或不生长，则说明供试品的检验量在检验条件下有抑菌作用，应采用增加冲洗量、增加培养基的用量、用中和剂或灭活剂、更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑菌作
用，并重新进行方法适用性试验。
方法适用性试验与供试品的无菌检查同时进行。
。只要供试品性质
允许，应采用薄膜过滤法。供试品无菌检查所采用的检查方法
和检验条件应与方法适用性试验确认的方法相同。
无菌试验过程中，若需用面活性剂、灭活剂、中和剂等试
剂，应证明其有效性，且对微生物无毒性。
检验数量：除另有规定外，按表1规定。
检验量：即接种量，除另有规定外，按表2规定。
阳性对照：应根据供试品特性选择阳性对照菌：无抑菌作用及抗革兰氏阳性菌为主的供试品，以金色葡萄球菌为对照菌；抗革兰氏阴性菌为主的供试品，以大肠埃希菌为对照菌；抗厌氧菌的供试品，以生抱梭菌为对照菌；抗真菌的供试品，以白色珠菌为对照菌。阳性对照试验的菌液制同“”，加菌量小于100cfu,供试品用量同供试品无菌检查时每份培养基接种的样品量。阳性对照管培养72小时内应生长良好。
阴性对照：供试品无菌检查时，应取相应溶剂和稀释液、冲洗液同法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。
供试品的处理及接种培养基操作时，用适宜的消毒液对供试品容器面进行彻消毒，如
供试品容器内有一定的真空度，可用适宜的无菌器材（如带有
除菌过滤的针头向容器内导入无菌空气，再按无菌操作启升容器取出内物。
薄膜过滤法：薄膜过滤法一般应采用封闭式薄膜过滤。，直径约50mm。根
据供试品及其溶剂的特性选择滤膜材质。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。
水溶性供试品：水溶性供试液过滤前应先将少量的冲洗液过滤，以润湿滤膜。取规定量，直接过滤，或混至含不少于100ml适宜的稀释液的无菌容器中，混匀，立即过滤。
如供试品有抑菌作用，须用冲洗液冲洗滤膜，冲洗数一般不少于3次（每滤膜每次冲洗量一般为100ml,且冲洗量不得超过1000ml,以避免滤膜上的微生物受损伤），所用的冲洗量、冲洗方法同方法适用性试验中确定的。除生
物制品外，一般样品冲洗后，1份滤器中加人100ml硫乙醇酸盐流体培养基，1份滤器中加入100ml胰酪大豆月东液体培养基。
非水溶性供试品：取规定量，直接过滤；或混合溶于适量含聚山梨酯80或其它适宜乳化剂的稀释液中，充分混合，立即过滤。%?1%聚山梨酯80的冲洗液冲洗滤膜至少3次。加入含或不含聚山梨酯80的培养基。接种培养基照水溶液供试品项下的方法作。
具有导管的医疗器具（输血、输液袋等）供试品：取规定量，每个最小装用50?100ml冲洗液分别冲洗内壁，收集冲洗液于无菌容器中，然后照水溶液供试品项下方法作。
同时应采用直接接种法进行装中所配带的针头、针管的无菌检查。
直接接种法：直接接种法适用于无法用薄膜过滤法进行无菌检查的供试品，即取规定量供试品分别等量接种至硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆月东液体培养基中。除生物制品外，一般样品无菌检查时两种培养基接种的瓶或支数相同。除另有规定外，每个容器中培养基的用量不得大于接种到该容器中的供试品体积的10倍，同时，