文档介绍：大豆磷脂检验操作规程
］目的：建立大豆磷脂检验操作规程。
2适用范围：适用于大豆磷脂检验操作。
3职责：检验人员对本规程的实施负责。
4规程:
:《中国药典》2010年版二部P1183。
:见《大豆磷十。
： ,置100ml锥形瓶中，加硫酸 5ml,加热至样品炭化，滴加浓过氧化氢溶液，至反应停止后 继续加热，滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色，冷却后加水10ml ,
蒸发至浓烟消失，照《碑盐检查操作规程》第二法检查，应符 合规定(% )o
:乙醇
精密称取无水乙醇适量，加水定量稀释制成每lml中含 ,作为对照品溶液。精密量取对照品溶液5ml
置顶空瓶中，密封； ,精密称定,置顶空瓶 中，精密加入水5ml使其分散，密封，作为供试品溶液。照《残 留溶剂测定法检验操作规程》测定，以聚乙二醇为固定液（或 极性相近的固定液）的毛细管柱为色谱柱，柱温为100 ;检测 器温度为250 ;进样口温度为200 ,顶空瓶平衡温度为80 , 平衡时间为45分钟。分别取供试品溶液与对照品溶液顶空进 样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，应符合规定。
：，精密称定,置25ml 量瓶中，用三***甲烷-甲醇（2:1）溶解并稀释至刻度，摇匀，
作为供试品溶液。另取溶血磷脂酰乙醇***与溶血磷脂酰胆碱对 照品各适量，用三***甲烷-甲醇（2 : 1）溶解并定量稀释制成 每1ml含溶血磷脂酰胆碱分别为10四、15四、20四、30p g、40四，含溶血磷脂胆碱分别为20四、60四、100四、200 pg、300pg的溶液,作为对照品溶液。照磷脂酰胆碱、磷脂 酰乙醇***与磷脂酰肌醇含量测定项下的色谱条件，精密量取各对 照品溶液20『，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，由回归方 程计算溶血磷脂酰乙醇***与溶血磷脂酰胆碱的含量。含溶血磷 脂酰乙醇***% ,%。
磷
对照品溶液的制备：精密称取经1051干燥至恒重的磷 ,置50ml量瓶中，加水溶解并稀 释至刻度，摇匀，精密量取10ml ,置另一50ml量瓶中， 加水稀释至刻度，摇匀。。
供试品溶液的制备：,精密称定，置凯 氏烧瓶中，加硫酸20ml与***50ml,缓缓加热至溶液呈淡 黄色，小心滴加过氧化氢溶液，使溶液褪色，继续加热30 分钟，冷却后，转移至100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇
测定法：精密量取对照品溶液与供试品溶液各2ml,分 别置50m I量瓶中，各依次加入钮酸锭硫酸试液4m I,亚硫酸 钠试液2ml与新鲜配制的对苯二酚溶液（, 加水适量使溶解，加硫酸1滴，加水稀释成100mI） 2mI,加 水稀释至刻度，摇匀，暗处放置40分钟，照《紫外分光光 度法检验操作规程》测定，在620nm的波长处分别测定吸收 度，计算含磷量。
本品按干燥品计算，含磷（P）不得少于2. 7%0
： ,精密称定，照《氮测定法
检验操作规程》第二法测定，计算，即得。
、磷脂酰乙醇***与磷脂酰肌醇含量：
照《高效液相色谱检验操作规程》测定。
色谱条件与系统适用性试验:用硅胶为填充剂（色谱柱
250mm* ,5m）;以甲醇-水-冰醋酸-三乙***（85 :
15 : : )为流动相A,以正丁烷-异丙醇-流动相A( 30 :
48 : 32 )为流动相B,柱温为40 ;按下表进行梯度洗脱;检测 器为蒸发光散射检测器。
时间(分钟)
流动相A(%)
流动相B(%)
0
10
90
20
30
70
35
95
5
36
10
90
41
10
90
取磷脂酰乙醇***、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇***、磷 脂酰胆碱、鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱对照品各适量，用三*** 甲烷-甲醇(2 ： 1 )溶解并定量稀释制成每1ml分别含上述对 照品为 50g、100g、100g、200gs 200gs 200g 的混合溶液, 取上述溶液201注入液相色谱仪，各成分按上述顺序依次洗 脱，各成分峰之间的分离度应符合规定，理论板数按磷脂酰 胆碱峰、磷脂酰乙醇***峰与磷脂酰肌醇峰计算应不低于1500。
测定法:精密称取磷脂酰乙醇***、磷脂酰肌醇和磷脂酰 胆碱对照品各适量，用三***甲烷-甲醇(2：1)溶解并定量稀 释制成每1ml含磷脂酰胆碱分别为50g、100g、150 g、200gs 300gs 400g ,含磷脂酰肌