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文档介绍

文档介绍:微生物学综合实验
实验一大肠菌群(.)的测定
1、实验目的和要求:
(1)了解大肠菌群在食品卫生检验中的意义  
(2)学****并掌握大肠菌群的检验原理和方法,以判别食品的卫生质量 
2 、实验原理
大肠菌群系指一群能在微生物学综合实验
实验一大肠菌群(.)的测定
1、实验目的和要求:
(1)了解大肠菌群在食品卫生检验中的意义  
(2)学****并掌握大肠菌群的检验原理和方法,以判别食品的卫生质量 
2 、实验原理
大肠菌群系指一群能在37℃经24h能发酵乳糖,产酸产气,需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,具有广泛的卫生学意义。它反映了食品是否被粪便污染,同时间接地指出食品是否有肠道致病菌污染的可能性。
3、材料
1 样品
乳、肉、禽蛋制品、饮料、糕点、发酵调味品或其他食品。
2 菌种
大肠埃希氏菌(Escherichia coli)
产气肠杆菌(Enterobacteria aerogenes)
3 培养基及试剂
单料乳糖胆盐发酵管、双料乳糖胆盐发酵管、乳糖胆盐发酵管、伊红美蓝琼脂(EMB)、革兰氏染色液。
4 其它
恒温箱、恒温水浴、药物天平、培养皿、载玻片等
4、流程、步骤
取样及稀释方法与菌落总数检验方法相同,做成1:10的均匀稀释液为检样。同一稀释度在做菌落总数的测定的同时接种乳糖胆盐发酵管,并且用大肠埃希氏菌、产气肠杆菌混合菌种作对照。
1 乳糖发酵试验
根据食品卫生要求或对检样污染程度的估计,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。接种量在1ml以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1ml及1ml以下者,用单料乳糖胆盐发酵管,同时用大肠埃希氏菌和产气肠杆菌混合菌种混合接种于1支作单料乳糖胆盐发酵管对照。置36±1℃温箱内,培养24±2小时,如所有发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则与对照的混合菌种一起按下列程序进行。
2 分离培养
将产气的发酵管分别在伊红美兰琼脂(EMB琼脂)平板上划线分离。然后置36±1℃温箱内,培养18~24小时后取出, 观察菌落形态,并作革兰氏染色和证实试验。
3 证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌落1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36±1℃温箱培养24±2小时,观察产气情况,凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌,即可报告为大肠菌群阳性.
4 报告
根据证实为大肠杆菌阳性的管数,查MPN表,报告每100ml(g)大肠菌群的MPN值。
5、结果