文档介绍：微生物限度检查法
、关系用药者生命健康的特殊商品,必须保证其质量,用药的安全与有效。微生物污染药品引起的药源性疾病屡见不鲜,在国内外均有报道。为保证药品质量,必须对微生物污染进行必要的控制和检验。其意义在于:
已有许多实例表明,药品污染微生物不仅危及病人用药安全,而且也直接影响药品的有效性,所以药品卫生质量是药品质量不可分割的部分。
反映药品生产工艺的科学性、合理性及质量管理水平。通过检验,凡工艺条件、生产管理水平、生产人员的素质差,不注意文明生产的单位和企业,其生产的药品,染菌必然严重,不合格率无疑就高。微生物限度的检验是提供药品卫生质量状况的重要依据,因而保证销售与使用过程中药品的有效性与安全性,是促进与提高生产单位全面质量管理水平与提高药品质量的重要依据。
微生物限度检查法概述
根据药品使用的要求,可划分为两大类:
规定灭菌的药品:包括注射剂和输液剂,及用于体腔、严重烧伤、溃疡、出血及眼科用药等制剂。
非规定灭菌药品:包括常用的口服制剂与一般外用制剂。对这一部分制剂一般不要求绝对无菌,允许一定限量的微生物存在,但同时规定不得有可疑致病的细菌存在。由于致病菌的范围很广,各国药典都规定了几个常见的致病菌或指标菌作为控制菌。
在非规定灭菌的制剂中,对每克或每毫升的药品按剂型或品种不同规定:
染菌量检查:包括细菌数、霉菌数及酵母菌数测定,以检查这几类微生物对药品的污染程度。
控制菌检查:包括大肠埃希菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌的检查等。
实验所用的培养基
营养琼脂培养基玫瑰红钠琼脂培养基
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD) 胆盐乳糖培养基(BL)
4-甲基伞形酮葡糖苷酸蛋白胨培养基(MUG)
乳糖培养基 5%乳糖培养基
蛋白胨水培养基磷酸盐葡萄糖胨水培养基
枸橼酸盐培养基曙红亚甲蓝琼脂(EMB)
麦康凯琼脂() 营养肉汤
微生物限度检查常用检验设备及器材
恒温培养箱 30~35℃ 36±1℃
霉菌培养箱 25~28℃
恒温水浴箱 45±1℃
净化工作台生物显微镜 1500X
体视显微镜或放大镜电冰箱
电热干燥箱 250~300℃
高压蒸汽消毒器
匀浆仪或研钵
锥形瓶 100ml,250ml,500ml,1000ml
直形吸管 1ml,10ml
量杯 10ml
试管 18x180mm,13x200mm,30x200mm
试管筒培养皿 9cm
培养皿筒陶瓦盖 12cm
量筒 100ml,500ml,1000ml
±
注射器 1ml,5ml,10ml,30ml
载玻片及盖玻片
接种针及接种环
试管架
乙醇灯康氏振荡器
离心机 500~4000/min 紫外灯 365nm
玻璃或搪瓷消毒缸(带盖)
大、小橡皮乳头
乙醇棉球或碘伏棉球
灭菌剪刀、镊子、钢锥
灭菌称样纸
灭菌不锈钢药匙
火柴、记号笔(玻璃铅笔)
白瓷盘、洗手盆
实验记录纸
细菌、霉菌与酵母菌的检查方法 (平皿菌落计数法)
(一)供试品的抽样、保存及检验量
1.  供试品应随机抽样。一般抽样量(2个以上最小包装单位)为检验量的3倍量。
。抽样时,凡发现有异常或可疑的样品, 应选取有疑问的样品,但机械损伤、明显破裂的包装不得作为样品。
凡能从药品、瓶口(外盖内侧及瓶口周围)、外观看出长螨、发霉、虫蛀及变质的药品,可直接判为不合格,无需在抽样检验。不能以外观有上述情况而检查内容物合格,来判断该药品合格。
,若有困难,应存放在该品种规定的储存条件下(一般为阴凉干燥处),勿冷藏或冷冻,以防供试品内污染菌因保存条件不妥引起致死、损伤或繁殖。
,应保持原包装状态,严禁开启,包装已开启的样品不得作为供试品。
,严防再污染。(原料药、装量大的药)
(中药蜜丸、膜剂,除需取自2个以上包装外,还应取4丸、片以上样品)。
(粘稠性供试品)制剂检验量为10克。
。
,中药膜剂检验量为30~50cm2 ,化学膜剂及生化药膜剂检验量为 100cm2 。
,除另有规定外,口服固体制剂不低于3克,液体制剂采用原液者不得少于6毫升,采用供试液者不得少于3毫升,外用药品不得少于5克 6
(二)实验操作前的准备
1. 将供试品及所有已灭菌的平皿、锥形瓶、匀浆杯、试管、研钵、吸管(1ml 10ml)、量筒、稀释剂等移至无菌室内。每次实验所用物品必须事先计划,准备足够用量,避免