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糖原PAS染色液试剂盒使用方法.docx

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糖原PAS染色液试剂盒使用方法.docx

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糖原PAS染色液试剂盒使用方法.docx

文档介绍

文档介绍:北京华越洋生物 QQ : 2374366200 糖原 PAS 染色液试剂盒(过碘酸- 雪夫染色液试剂盒) 编码品名规格单位北京华越洋生物 GT 7203-4 ×5 0ml 糖原 PAS 染色液试剂盒 4× 50 ml盒北京华越洋生物 GT 7204-4 × 100ml 糖原 PAS 染色液试剂盒 4× 100ml 盒产品简介: 糖原染色是病理学中常规的染色方法之一, McManus 在 1946 年最先使用高碘酸- 雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂, 它能氧化糖类及有关物质中的 1, 2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与 Schiff 试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。试剂盒组成: 试剂( A)过碘酸溶液试剂( B) Schiff 试剂试剂( C)苏木素染色液试剂( D)酸性乙醇分化液?备材料: 1、 10% 福尔马林固定液 2、蒸馏水 3、乙醇操作步骤(仅供参考): 1、常规固定,常采用 10% 的福尔马林,常规脱水包埋。 2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。 3、自来水冲洗 2~ 3min ,再用蒸馏水浸洗 2次。北京华越洋生物 QQ : 2374366200 4、置于过碘酸溶液中,室温放置 5~ 8min ,一般不宜超过 10min 。 5、自来水冲洗 1次,再用蒸馏水浸洗 2次。 6、样本放入 Schiff 试剂,置于室温阴暗处,浸染 10 ~ 20min 。 7、自来水冲洗 10min 。 8、样本置于苏木素染色液中,染细胞核 1~ 2min 。 9、酸性乙醇分化液分化 2~ 5s 。 10 、自来水冲洗 10 ~ 15min 后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。 11 、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。染?结果: PAS 反应阳性物质红色或紫红色细胞核蓝色细胞质深浅不一的红色备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和 Schiff 试剂中作用时间的长短。阴性对照(可选): 1 、对照切片可以用唾液,取唾液片(过滤后用)处理 30 ~ 60min 后,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。 2、对照片可以淀粉酶,取淀粉酶 1g 于双蒸水或 PBS() 100ml ,处理 30 ~ 60min 后,与其他切片共同入过碘酸溶液。结果应为阴性。 3、如果对照片采用其自身样本, 对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入 Schiff 试剂。染色结果:对照片呈阴性反应,无紫红色颗粒。注意事项: 1、切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。 2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以 18 ~ 22 ℃最佳。 3、过碘酸溶液和 Schiff 试剂应置于 4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前,最好提前 30min 取出恢复到在室温后,避光暗处使用。 4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。北京华越洋生物

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