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RP-HPLOW时测定克银颗粒中的靛蓝和靛玉红
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克银颗粒是由青黛、苦参、白花蛇舌草等九味药组成的复方制剂,该药具有清热解毒、凉血活血、祛风止痒的功效,是第四军医大学唐都医院皮肤科治疗银屑病的经验方。处方中君药青黛具有清热解毒、凉血消斑、泻火定惊的功能,用于温毒发斑、血热吐岫、胸痛咳血、口疮、疙腮、喉痹、小儿惊痫[1-2]。青黛的主要有效成分是靛蓝和靛玉红,为了有效控制该制剂质量,本文采用反相高效液相色谱法同时测定克银颗粒中青黛主要药效成分靛蓝和靛玉红的含量,结果显示,所建立的方法简便、准确、可靠,为克银颗粒质量控制研究提供了实验依据。
1仪器与试药
美国Agilent1100高效液相色谱仪(Agilent1100泵,Agilent1100DAD佥测器,Agilent2100色谱工作站);BP211D电子分析天平(德国Sartorius公司);KQ-32000D理数控超声波仪(昆山超声仪器有限公司)。
靛蓝对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110716-200610)、靛玉红对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110717-200204);甲醇为色谱纯;水为超纯水;其余试剂为分析纯;克银颗粒(第四军医大学唐都医院药剂科制备,批号:20100111、20100118、20100125)。
2方法与结果
,加N,N-二甲基甲酰胺(。,。
,,加50mLDMF超声处理(250叫33kHz)30min,转入100mL量瓶中并定容;,用甲醇稀释至10mL的量瓶中,用于靛蓝的含量测定;另取续滤液5mL用甲醇稀释至10mL的量瓶中,用于靛玉红的含量测定。
,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。
色谱柱为PhenomenexC18(250mn^,流动相为甲醇-水(80:20,V/V),,柱温为30C;靛蓝的检测波长为287nm,靛玉红的检测波长为292nm。理论板数分别按靛蓝峰和靛玉红峰计算均应不低于3000。
取供试品溶液、阴性供试品溶液及适当浓度的靛蓝、靛玉红对照品溶液,于不同波长的色谱条件进样。在靛蓝、靛玉红对照品相应色谱峰位置处无其他色谱峰出现,靛蓝的