文档介绍：思考题 1 .细胞工程实验室的基本组成与要求是什么? 一、实验室组成(1) .基本实验室①准备室/ 化学实验室功能: 就是进行一切与实验有关的准备工作要求: 宽敞明亮,通风条件好,地面便于清洁并应防滑处理。②接种室/ 无菌操作室功能: 是进行接种、继代、细胞融合等无菌操作的场所。要求: 封闭性好, 干燥清洁明亮, 防止空气对流。外应设缓冲室、更衣室, 防止微生物感染。③培养室功能: 是对接种到培养瓶的离体材料进行控制培养的场所。要求: 是要能控制光照和温度,应保持干燥和清洁。(2) .辅助实验室根据具体的实验需求而定。细胞学实验室生化分析室摄影室及暗室( 3.) 移栽设施/ 温室要求: 配置人工光源并且能够控制室内温度, 为试管苗的正常生长提供适宜的环境。 2. 外植体消毒的基本方法是什么? 3 .无菌操作在植物离体培养中的作用是什么? 4. 配制培养基时,加入一定量的植物生长调节物质,它们在离体培养过程中有哪些作用? 激素调控的一般规律是什么? 植物激素或生长调节剂( growth regulators )包括: 生长素类细胞分裂素类(CTK) 赤霉素类(GA) 乙烯( Eth) 脱落酸(ABA) 其中前三者为正向激素,后两者则为负向激素。常用的主要有生长素类和细胞分裂素类两大类。①生长素类( auxin ): 在作用或结构上类似于吲哚乙酸的一类物质的统称。生长素是最早发现的植物激素。作用: 诱导愈伤组织形成, 促进细胞的分裂和伸长, 诱导根原基的发生和根系的生成, 有调运养分的效应。使用浓度 ~ 10mg/L 。常用的生长素有: 吲哚乙酸(IAA) 、2,4, 二***苯氧乙酸(2,4-D) 吲哚丁酸(IBA) 奈乙酸(NAA) ②细胞分裂素类(cytokinin,CTK) : 是一类促进细胞分裂的植物激素,细胞分裂素都为腺嘌呤的衍生物。作用: 促进细胞分裂和分化,诱导不定芽的形成,促进胚状体的发育,延缓组织的衰老,打破顶端优势,有利于芽的增殖,常用于继代和增殖培养。使用浓度 ~ 10mg/L 。常用的细胞分裂素有: 激动素(KT) 6- 苄基腺嘌呤(6-BA/BAP) 玉米素( ZT )异戊烯氨基嘌呤(2-ip) 噻重氮苯基脲( TDZ ) 5. 常用的植物细胞培养基种类有哪些?各有什么特点? MS 培养基无机盐含量较高,微量元素种类较全,浓度也高。其养分的数量和比例较合适,离子平衡性较好,具较强的缓冲能力, 培养过程中较稳定, 可满足植物的营养和生理需要。其中它的***盐含量较其它培养基为高。广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养, 效果良好。有些培养基是由它演变而来的。 N6 培养基 KNO 3和( NH 4)2 SO 4 含量高, VB1 含量高, 不含钼。目前在国内已广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花粉和花药培养和组织培养。 B5 培养基 KNO 3 含量高,有机物含量较高,但含有较低的铵, 这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B 5 培养基上生长更适宜,如双子叶植物特别是木本植物 H 培养基大量元素约为 1/2MS ,微量元素减少但含量增加, 维生素种类较多。用于多种植物的花药、胚培养。 W hite 培养基特点:是无机盐浓度较低,有机成分含量也相对较低。适于生根培养。 KM - 8P培养基有机成分较复杂。它包括了所有的单糖和维生素。广泛用于原生质体和融合体的培养。 6 .简要说明 MS 培养基的基本组成。 7. 配制培养基时,为什么要先配母液? 如何配制母液? 在组织培养工作中, 配制培养基是日常工作,为了简便起见,将培养基配方中的药品配成一定倍数的浓缩液, 用时稀释, 这种浓缩液就是母液贮备液。母液储备液可一次称量供一段时间使用, 简单方便, 不仅可以提高培养基中微量成份称量的准确性,还可以减少工作量,提高效率。母液贮备液的配制要求①大量元素母液配制: 10x , 20x , 50x ②微量元素母液配制: 1000x ③铁盐母液配制: 100x 或 200x , 分别溶解 EDTA-Na2 与 FeSO4 · 4H2O ,再充分混匀,贮存在棕色瓶中④有机母液配制:可以分别配制 100 ~ 200X ,也可以混在一起配制⑤肌醇一般单独配置成 100x 。⑥生长调节物质配制: 分别单独配制成母液, 储存于冰箱。一般浓度为 ~1 mg / ml 。并注意不同激素需加入不同助溶剂 8. 如何判断配制好的培养基是否良好? 9. 植物培养基和微生物培养基有什么不同? 第三章 1. 植物细胞全能性的含义是什么?其实现的途径是什么? 每个植物生活细胞无论是体细胞还是生殖细胞,均具有该物种全部的遗传信息。每个植物生活细胞均具有发育成完整植株的潜在能力。细胞全能性仅是一种能力或可能