文档介绍：谷丙转氨酶（GPT ）活性的测定预习报告
1•研究背景：转氨酶是体内重要的一类酶。转氨酶催化a-氨基酸的a-氨基与a-酮酸
的a-酮基之间的相互转化，从而生成一种新的氨基酸与一种新的酮酸，这种作用称为转氨基作用。它在生物体内蛋白质的合血测1
血测2
血测3
肝对1
肝对2
肝对3
血对1
血对2
血对3
备注：“肝测”表示“肝脏测定管”，“肝对”表示“肝脏测定对照管”，血清的简称亦然。
用EXCEL以各管吸光度减去1号管吸光度，所得差值为纵坐标，相应的丙酮酸浓度为横坐标，作标准曲线图；
每一步的作用
（1）稀释肝脏匀浆液的作用是：因为酶量过高时，丙酮酸产量与酶量之间更加不符合线性关系，稀释后可以避免由于肝脏酶活力过高，对测定的影响；
（2）测定管加入稀释后的肝脏溶液是为了提供谷丙转氨酶，作为对照管故不加稀释后的肝脏溶液；
（3）对基质液预热是为了使得一定时间内酶促反应温度恒定，加入基质液是为了让具有酶的试管启动转氨反应；
（4）准确保温 30min 是为了控制酶促反应时间，方便衡量酶的比活；
（5）加入2,4-二硝基苯肼是为了使得转氨酶失活，同时作为与丙酮酸反应的底物；
（6）对照管加入等量稀释后的肝脏是为了减少测定误差，尽量出去除丙酮酸二硝基苯腙对 OD 值的影响；
（7）溶液混合后，37°C水域20min是使得丙酮酸充分地与2,4-二硝基苯肼反应；
（8）加入 5ml 是为了提供碱性环境，使丙酮酸二硝基苯腙呈现特异性光吸收。

时间分配（预计完成时间）：
6质疑及相关思考
（1）转氨酶在细胞内的作用及生理意义？细胞内有众多的转氨酶，但相关研究及医学临床应用中却几乎都是只检测谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）的活力，而极少测定其它转氨酶活力，你推测可能的原因会是什么？为什么？
转氨酶在代谢中起着非常重要的作用，因为多数氨基酸都可以通过转氨酶作用脱去氨基进行降解，并且所有氨基酸的合成过程中，其氨基酸都是直接或者间接地来自谷氨酸参与的转氨基过程；医学临床中只是检测GPT和GOT，肝脏中GPT活力最高，GPT活力测定可诊断肝功能的正常与否，急性肝炎患者血清中GPT活力可明显地高于正常人GPT，测定GOT活力则有助于对心脏病变的诊断，心肌梗塞时血清中GOT活性显示上升。而其他转氨酶在身体各个器官和部位相当，测量其他转氨酶对医疗方面指导意义不大。
（2）转氨酶催化的是双底物可逆反应，根据酶活力测定的总体思路，在设计转氨酶的活力测定实验方案时如何保证测得的是反应的初速度？为什么？
首先，在不影响测定的前提下保证底物浓度足够大；其次，考虑反应时间和产物浓度，二者权其重的前提下尽量减少反应时间。由于此时产物浓度相对于底物浓度是非常小的，这样就可以忽略逆反应带来的影响。
（3）转氨酶测定是医学临床上用以检测相关疾病的重要指标，测定方法的历史建立了金氏法、穆氏法及赖氏法（包括改良赖氏法），请查询资料，分别明确三种方法的酶活单位定义、各自测定的酶促反应时间，三种方法的主要