文档介绍：高效液相色谱法测定甘草苷和甘草酸含量甘草是蕴藏量大、药用价值高的一种荒漠草原药用植物, 其主要有效成分为甘草酸和黄***类化合物。科标检测研究院承接中药材及其他保健产品的有效成分和功效检测。为保健品的发展提供坚实的科学依据。在 2014 年帮助客户论文课题达到 200 余篇,为客户提供检测数据,检测方法, 检测图谱等论文需要的资料。以下是高效液相色谱法测定甘草苷和甘草酸含量介绍: 目的建立甘草苷和甘草酸的 HPLC 含量测定方法。该方法操作简便、准确,线性相关系数良好, 且稳定性和重复性好, 适用于甘草黄***粗提物及纯化物中甘草苷和甘草酸的含量测定。经典的黄***含量测定方法, 是以芦丁为对照品, 采用紫外分光光度法测定, 但此方法用于甘草黄***的测定尚有诸多不足之处。甘草黄***的主要成分甘草苷, 是反映甘草黄***内在质量的一个重要指标[6]。本研究以甘草苷为对照品, 采用 HPLC 法测定甘草黄***含量的方法,同时研究优化以 HPLC 测定甘草酸含量的方法,以期为甘草有效成分的综合开发利用和质量监控提供新的方法和思路。 1 仪器与材料 仪器: 高效液相色谱仪;可变紫外检测器;万分之一天平; 超声波清洗器。 材料甘草。甘草苷对照品、甘草酸单铵盐对照品; 95% 乙醇、冰醋酸、乙酸***、甲醇(色谱纯)、乙***(色谱纯)。 2 方法与结果 色谱分析条件 甘草苷检测条件色谱柱为 KromasiL-C18 ( × 200mm ,5μm); 流动相为乙***-% 醋酸( 20∶ 80 );紫外检测波长: 276nm ;流速 · min-1 ;柱温为室温;进样量 20μl。理论塔板数按甘草酸铵峰计算应不低于 4000 。对照品和甘草黄***粗提物的色谱图见图 1~2。 甘草酸检测条件色谱柱为 KromasiL-C18 ( × 200mm ,5μm); 流动相为甲醇- · L-1 乙酸铵溶液- 冰醋酸( 67∶ 32∶1); 紫外检测波长 252nm ; 流速 · min-1 ; 柱温为室温;进样量 20μl 。理论塔板数按甘草酸铵峰计算应不低于 2000 。 对照品及供试品溶液的配制 对照品溶液的配制取甘草苷和甘草酸单铵盐对照品适量,精密称定,用流动相配制成浓度为 54μg· ml-1 的甘草苷对照品溶液和 120 μg· ml-1 的甘草酸单铵盐对照品溶液。 供试品溶液的制备精密称取甘草黄***提取物适量,用相应的流动相溶解,定溶于 10ml 量瓶中,作为甘草苷供试品溶液。精密称取甘草黄***提取物适量, 用相应的流动相溶解, 定溶于 10ml 量瓶中, 作为甘草酸供试品溶液。 检测波长的选择以流动相为参比溶液,在 200 ~ 400nm 波长范围内分别对甘草苷和甘草酸对照品溶液进行扫描, 结果表明, 甘草苷在 276n m 处有一最大吸收峰, 甘草酸在 252n m 处有一最大吸收峰,所以选定 276nm 为甘草苷的检测波长, 252nm 为甘草酸的检测波长。 线性关系的考察精密吸取甘草苷对照品储备液 , , , , , l 于 10m l 量瓶中,用 20% 乙***定容至刻度