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乳酸菌的分离纯化.docx

上传人:kunpengchaoyue 2022/6/27 文件大小:15 KB

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乳酸菌的分离纯化.docx

文档介绍

文档介绍:乳酸菌的分离与纯化
实验目的
2渎验材料
2・1试验设备
天平、牛角匙、电炉、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻璃棒、试管、棉塞、培养基、吸管、牛皮纸、线绳、标签、500mL锥形瓶两个、250mL锥形瓶两个、试管20只、5性,涂片镜检细胞杆状或链球状,革兰氏染色显阳性,则可将其连续传代3次,最终选择出在3~6h能凝固的牛乳管,作菌种待用。

发酵:观察BCG培养基中乳酸菌菌落特征,选取长势比较好的菌落无菌操作下将乳酸菌接种于装有脱脂乳的试管中,40〜42C静止培养。
检测:为了便于测定乳酸发酵情况,取脱脂乳试管中的溶液进行革兰氏染色,显微镜检
查。革兰氏阳性,无芽胞的球菌或杆菌可定为乳酸菌,记录测定结果。
5.21
上午
清洗仪器、
下午
配BCG牛乳培养基100m1、灭菌、倒平板
下午
乳酸菌、划线分离、配脱脂乳试管100m1、灭菌、装10支试管
5.22
上午
配BCG牛乳培养基100m1、灭菌、倒平板
下午
等待灭菌
5.23
上午
第一代接到脱脂乳试管、培养24h(21日平板仍染菌选相似菌落乳酸菌为第一代)
下午
做无菌水(20min灭菌121°C)、空锥形瓶灭菌装清明酸奶划线分离
5.24
上午
配BCG牛乳培养基100m1、灭菌、倒平板(先B后A)、脱脂乳试管第二代划线分离、脱脂乳试管做革兰氏染色
下午
等待灭菌
5.26
上午
配BCG牛乳培养基100m1、灭菌、倒平板(先B后A)、第三代划线分离(光明由于染菌就此终断光明的接种)
下午
等待灭菌
5.27
上午
第三代接种到脱脂乳试管中
下午
配制BCG牛乳培养基100m1、灭菌、倒平板(先B后A)、
5.28
上午
27日平板染菌,将剩余BCG牛乳培养基灭菌、倒平板、用脱脂乳试管做第四代划线分离及革兰氏染色
下午
等待灭菌
5.29
上午
配酸奶培养基100ml两瓶、灭菌、冷却至不烫手为宜将第四代接种到酸奶培养基、待凝固
下午
写实验报告
(伊利、蒙牛)新鲜酸奶,用接种环将两种酸奶接入已经配好的BCG培养平板中(注意整个过程应在无菌条件下操作),接好种后帖上标签进行培养。
培养后的平板上大多都染上了杂菌,杂多为灰白色,只要个别平板长有淡黄色的乳酸菌菌落,且长势不好。
第一代:选择长势较好的乳酸菌菌落,用接种针在无菌条件下将菌种接入两只脱脂乳试管中,接好种后帖上标签进行培养。
结果:两只脱脂乳试管,一支凝固较好,颜色为乳白色略显黄,表面有淡黄色上清液,一支凝固不好。
对试管中的酸奶进行了革兰氏染色,现象如下:显微镜下:有3种菌,革兰氏染色为紫色,有球菌、链球菌和少量细长的杆菌
第二代:选择凝固较好的脱脂乳试管,用接种环在无菌条件下将菌种接入BCG培养平板中,接好种后帖上标签进行培养。
培养结果:平板上没有长出较好的菌落,且长有杂菌。杂菌的菌落为突起的水泡、灰白色,经革兰氏染色为紫色,为粗短的杆菌有荚膜。有的平板长有少量的乳酸菌,颜色为乳白色略显黄。
染菌的平板第三代:选择长势较好的乳酸菌菌落,用接种针在无菌条件下将菌种接入剩余八只脱脂乳试管中,接好种后帖上