文档介绍：1 高效液相色谱法测定柴胡颗粒中黄芩苷含量【摘要】目的建立高效液相色谱法测定柴胡颗粒中黄芩苷含量的方法。方法采用超声法提取柴胡颗粒中黄芩苷, 用高效液相色谱法测定其含量。结果本方法线性方程为: A=-53 +2 417 ( r= ), 线性范围 ~ , 精密度试验:RSD=% ( n=5 ); 平均加样回收率为 % 。结论 HPLC 法可作为柴胡颗粒中黄芩苷含量测定方法, 本实验为该产品的质量控制提供了实验依据。【关键词】高效液相色谱; 柴胡颗粒; 黄芩苷柴胡颗粒制剂是由柴胡、姜半夏、黄芩、党参、干草、生姜、大枣等组成的复方制剂, 具有解表散热、疏肝和胃功能, 用于寒热往来、胸胁苦满、心烦喜吐、口苦咽干等症状。本方中黄芩为君药, 其主要成分为黄芩苷, 为了更好地控制该药的生产质量, 本文建立了高效液相色谱法测定柴胡颗粒中黄芩苷含量的方法[ 1], 结果表明, 该方法简便, 灵敏度高,重现性好。现报告如下。 2 1 仪器与试剂仪器大连依利特高效液相色谱仪,LIV230+ 紫外- 可见检测器,EC200 0 色谱数据处理系统;AB204-N 电子分析天平( 梅特勒- 托利多仪器有限公司) ;CQ-250 超声波清洗器(上海必能信超声仪器有限公司) ; μm 过滤膜。试剂黄芩苷标准品( 中国药品生物制品检定所);柴胡颗粒(昆明云健制药有限公司提供) ; 甲醇为色谱纯, 水为双蒸水, 其他试药均为分析纯。 2 方法与结果色谱条件色谱柱:Hypersil ODS2 柱( 5μ m, 250mm × mm ); 流动相: 甲醇:水: 磷酸=47:53:, 柱温:25 ℃;流速:; 进样量 10μ l; 理论踏板数按黄芩苷计不低于 3000 。在此条件下, 黄芩苷能与其他组分达到基线分离。标准品溶液制备精密称取黄芩苷对照品适量,加 70% 的甲醇溶解制成每毫升含 50μg 的溶液。 3 供试品溶液的制备精密量取柴胡颗粒制剂 ( 含黄芩苷 5mg ),置 100ml 容量瓶中, 加入 70% 甲醇约 50ml, 超声 30min, 静置放冷。用 70% 甲醇定容至 100ml, 摇匀, 经滤器过滤, 取续滤液作为供试品液; 另按处方工艺制备不含黄芩的阴性样品, 按样品液制备方法制成阴性样品溶液[ 2]。干扰性试验分别取黄芩苷对照品溶液、样品溶液和阴性对照溶液, 各进样 10μl 测定。结果表明阴性对照品未呈现与对照品保留时间相同的色谱峰, 对测定无干扰。样品含量测定线性关系考察精密称取黄芩苷对照品 , 置 100ml 容量瓶中,加 70% 甲醇溶液溶解至刻度, 摇匀, 分别精密量取、、、、置 10ml 量瓶中加 70% 甲醇至刻度, 摇匀。分别精密量取以上 5 种浓度溶液 10μl 注入高效液相色谱仪进行测定。得回归方程: A=-53 +2 417 ( r= ), 表明黄芩苷进样量在 ~ l 范围内,峰面积和进样