文档介绍：HPLC法测定桑姜感冒片中绿原酸的含量
史国举 [摘要] 目的建立高效液相色谱(HPLC)法测定桑姜感冒片中绿原酸的方法。方法采用HPLC法,以Eclispse XDB C18( mm×250 mm,5 μm)为色谱品(中国药品生物制品检定所,批号110753-200911,供含量测定用);乙***、甲醇为色谱纯,磷酸为分析纯,水为娃哈哈纯净水;桑姜感冒片(四川好医生攀西药业有限责任公司,国药准字Z19983141)。
2 方法与结果
色谱条件
色谱柱:Eclispse XDB C18柱( mm×250 mm,5 μm);流动相:乙***-%磷酸溶液(15∶85);检测波长:326 nm;柱温:30℃;流速: mL/min;进样量:10 μL;色谱柱的理论板数按绿原酸峰计,应不低于5 000[2-3]。
对照品溶液的制备
精密量取105℃干燥至恒重的绿原酸对照品约50 mg,至100 mL棕色容量瓶中,用体积分数50%甲醇溶解并定容至刻度,摇匀, mg/mL的绿原酸对照品溶液,备用[4]。
供试品溶液的制备
取桑姜感冒片10片( g/片),研细, g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入体积分数50%甲醇50 mL,称定质量,超声处理20 min,放冷,再称定质量,用体积分数50%甲醇补足减少的重量,摇匀,过滤,滤液再经微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。
标准曲线的制备
、、1、2、3、5 mL,分别置于5 mL棕色容量瓶中,分别用体积分数50%甲醇稀释解并定容至刻度,摇匀,精密量取10 μL注入高效液相色谱仪,,以峰面积值(A)为纵坐标,绿原酸对照品进样量(C)为横坐标,进行线性回归。得回归方程为A= + ,r= 8,结果表明,~ μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。
精密度试验
mg/mL的绿原酸对照品溶液10 μL,,测定绿原酸的色谱峰面积,%(n=5),表明高效液相色谱仪的精密度良好。
稳定性试验
取同1份供试品溶液,分别在0、2、4、8、12、16、24 h,精密量取10 μL,,测定绿原酸的色谱峰面积,%(n=7),表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。
重复性试验
取相同批号供试品粉末5份,,精密量取10 μL,,测定绿原酸的色谱峰面积,%(n=5),表明本测定方法的重现性良好。

加样回收率试验
精密量取已知绿原酸含量( mg/片)的桑姜感冒片细粉6份, g, mg,,精密量取10 μL,,测定绿原酸的色