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沙门氏菌检验
沙门氏菌检验
范围
本法适用于食品中沙门氏菌的检验。
设备和材料反应结果见表2。
表2 沙门氏菌属在三糖铁琼脂和懒氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果
三糖铁琼脂
懒氨酸脱羧酶试验培养基
初步判断
斜面
底层
产气
硫化氢
K
A
＋（－）
＋（－）
＋
可疑沙门氏菌属
K
A
＋（－）
＋（－）
－
可疑沙门氏菌属
A
A
＋（－）
＋（－）
＋
可疑沙门氏菌属
A
A
＋/－
＋/－
－
非沙门氏菌
K
K
＋/－
＋/－
＋/－
非沙门氏菌
注：K：产碱，A：产酸；＋：阳性，－：阴性；＋（－）：多数阳性，少数阴性；＋/－：阳性或阴性。
接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时，可直接接种蛋白胨水（供做靛基质试验）、尿素琼脂（）、***化钾（KCN）培养基，也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于
36℃±1℃培养18h～24h，必要时可延长至48h，按表3判定结果。将已挑菌落的平板储存于2℃～5℃或室温至少保留24h，以备比必要时复查。
表3 沙门氏菌属生化反应初步鉴别表
反应序号
硫化氢（H2S）
靛基质
尿素
***化钾（KCN）
懒氨酸脱羧酶
A1
＋
－
－
－
＋
A2
＋
＋
－
－
＋
A3
－
－
－
－
＋/－
注：＋阳性；－阴性；＋/－阳性或阴性。
反应序号A1：典型反应判定为沙门氏菌属。如尿素、KCN和懒氨酸脱羧酶3项中有1项异常，按表4可判定为沙门氏菌。如有2项异常为非沙门氏菌。
表4 沙门氏菌属生化反应初步鉴别表
尿素
***化钾（KCN）
懒氨酸脱羧酶
判定结果
－
－
－
甲型副伤寒沙门氏菌（要求血清学鉴定结果）
－
＋
＋
沙门氏菌Ⅳ或Ⅴ（要求符合本群生化特征）
＋
－
＋
沙门氏菌个别变体（要求血清学鉴定结果）
注：＋表示阳性；－表示阴性。
反应序号A2：补做甘露醇和山梨醇试验，沙门氏菌靛基质阳性变体两项实验结果均为阳性，但需要结合血清学鉴定结果进行判定。
反应序号A3：补做ONPG。ONPG隐形为沙门氏菌，同事赖氨酸脱羧酶阳性，甲型副伤寒沙门氏菌为赖氨酸脱羧酶阴性。
必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴别。
表5 沙门氏菌属生化群的鉴别
项目
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
卫矛醇
＋
＋
－
－
＋
－
山梨醇
＋
＋
＋
＋
＋
－
水杨苷
－
－
－
＋
－
－
ONPG
－
－
＋
－
＋
－
丙二酸盐
－
＋
＋
－
－
－
KCN
－
－
－
＋
＋
－
注：＋表示阳性；－表示阴性。
如选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物鉴定系统，可根据的初步判断结果，从营养琼脂平板上挑取可疑菌落，用生理盐水制备成浊度适当的菌悬液，使用生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统进行鉴定。
血清学鉴定
抗原的准备
一般采用%～%琼脂培养物作为玻片