文档介绍：一年生栽植黄芪中黄芪多糖对人外周血T细胞增殖的影响
【关键词】黄芪多糖；,,人参总皂苷；,,淋巴细胞
摘要：目的观察1年生栽植黄芪中黄芪多糖〔APS1〕及其与人参总皂苷(TG)联用时对人外周T细胞(hPBTs)的增殖的影响。近年来许多学者从不同角度对其进展了研究，结果说明APS具有很好的免疫调节作用［1］。不同生常年限黄芪中均含有黄芪多糖，而1年生栽植黄芪中黄芪多糖〔APS1〕的含量较高［2］。为了讨论APS1的生物活性，本文研究了APS1及其与人参总皂苷(TG)联用对人外周T细胞增殖反响的影响。现将结果报道如下。
1材料
RT-2100型酶标仪〔美国Rayt公司〕；T2323型2培养箱〔美国Sheldnanufaturing公司〕；LDZ52型离心机〔北京医用离心机厂〕；透析袋〔1200014000，华美生物工程公司北京分公司〕；1年生栽植黄芪(于202210末采集于吉林省和龙市,由吉林省延边大学医学院生药学教研室吕惠子副教授鉴定为膜荚黄芪AstragalusebraneaeusFish.)；人参总皂苷(吉林省宏久生物技术)；四***偶氮唑盐〔TT〕〔华美生物工程公司北京分公司〕；植物血凝素〔PHA〕〔广州市医药工业研究所〕；环磷酰***〔Y〕〔江苏恒端医药股份〕；二***亚砜〔DS)等其他试剂均为分析纯。
2方法
，加水〔20，10，10倍〕，80℃温度条件下提取3次〔2，1，1h〕，过滤，滤液浓缩至约500l,加95％乙醇至醇度达80％，放置过夜，沉淀加水溶解，过滤，经Sevag法［3］除蛋白7次，用氨水调pH至8，加3％过氧化氢后放置37℃水浴12h,过滤，滤液置透析袋中流水透析12h,液体浓缩再醇沉，放置过夜，沉淀用无水乙醇和***洗涤，枯燥，〔％〕。
〔TT法〕［4］
，①APS11组：APS125μg/l；②APS12组：APS150μg/l；③APS13组：APS1100μg/l；④TG1组：TG5μg/l；⑤TG2组：TG10μg/l；⑥TG3组：APS120μg/l；⑦联用1组：APS125μg/l+TG5μg/l；⑧联用2组：APS150μg/l+TG10μg/l；⑨联用3组：APS1100μg/l+TG20μg/l；⑩对照组：生理盐水。
，按常规别离淋巴细胞，用完全培养液调整细胞的密度为1×106/l，台盼蓝染色检测细胞存活率95％。取100μl参加96孔细胞培养板中，参加终浓度为10μg/l的PHA，并按实验分组参加ASP1，TG溶液或生理盐水〔同时每组分别以培养液代替细胞液作为空白对照〕，每组设3个复孔，置37℃,5%2培养箱中培养。48h后，每孔参加TT溶液〔5g/L〕10μl，继续培养4h，离心，弃上清液，参加DS150μl,充分振荡后静止20in，用酶标仪于波长490n处测定吸光度值，结果以4个复孔的平均吸光度值A490n〔实验组A490n=A490n加供试品组－A490n空白对照〕和细胞增殖百分率表示〔细胞增殖百分率＝实验组A490n/对照组A490n×10