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薄层板的制备方法.docx

上传人:suijiazhuang1 2022/7/16 文件大小:16 KB

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薄层板的制备方法.docx

文档介绍

文档介绍:薄层板的制备及应用中的问题
(1) 配制优质CMC溶液。取50g缩***纤维素钠,在搅拌下加入到 5000mL水中,强力摇匀,放置备用。使用时,用300目丝网过滤,所 得滤液即为铺制薄层板的优质CMC溶液。(由于CMC在水中溶解速度很 慢,用洗液泡,如果还解决不了那就只好放弃这 块玻璃板了,有说可以用盐酸的。
关于研磨及铺板要求:
硅胶的研磨,当然是一个方向了,可以适量的加入一定量 的无水乙醇或***来消泡,也可以适当搅拌后在干净容器内超 声,效果都是不错的。手工铺硅胶的用量一般
10*20的约3〜 4克,硅胶和CMC-Na的用量一般是1: 〜3,具体根据要 铺板子的厚度和CMC-Na的浓度决定。
依据薄层板使用需要,将适量研好的吸附剂倒到薄层板上, 先用小锤将吸附剂荡匀,倾斜薄层板,使吸附剂流至薄层板一 侧,待吸附剂蓄积一定量后,再反向倾斜薄层板,使吸附剂回 流然后是另外两个方向,重复操作,后轻颠几下薄层板即可。
将载玻片置于平台上,用药匙舀取糊状硅胶,均匀地铺在 载玻片表面。铺板时,可以顺着板中间倒,也可以顺着某个边 缘倒,也可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上,倒时也要注 意不要引入小气泡。如有需要,可以双手10个指头托住玻璃 板,有节奏的颠簸,使得糊状硅胶分布匀称。尤其是载板的四 个角,容易高出玻璃板其他部位,所以要格外注意。颠好的板, 表面看上去要光滑平整,没有气孔。薄层板铺好后一定要放置 在平的台面上,否则难保证板面硅胶的厚度均匀。
铺制好的薄层板先让其稍干后,即看不出有明显的水印,放 入烘箱内用50度以下的温度鼓风干燥30分钟,再升温干燥至 干,注意升温过快在使用的过程中有可能发生起层的现象不利 于分离。
关于裂板:
板子会裂口,一则可能是因为硅胶的比例太大,二则可能是 板子要在常温下晾干后,才能在烘箱中活化。如果铺完不久就
在较高温度下,裂口的几率就比较高的。关于活化出现裂板、 爆板的问题,我从没有遇上过。活化我是这样处理的,不要等 到温度达到100度,而是设好温度后就将板子放在干燥箱,然 后再通电加热,达到最高温度后停留5分钟左右即可。这样水 分是慢慢由内而外散发,而不是由外向内散发,避免了表面成 膜,里面还在散发水气,岂有不裂、不爆的道理! 关于展开剂:
分离的样品酸性比较大,一般在展开剂中加酸。加甲酸是因为 该样品是酸性的,加酸的量和该物质的酸性成正比关系,加水 可能是因为样品是苷类的用酸水做一下缓冲,目的就是让斑点 圆滑,不脱尾,展距良好。饱和非常重要,边缘效应很严重的 不妨用下端浸在展开剂中的滤纸上,贴在展开缸的内壁,这样 饱和效果会好一些。
1) 在层析缸口涂适量凡士林,增加密封性;
2) 以展开剂边缘效应的大小,确定展开剂平衡时间的长短,
一般平衡时间在30分钟即可。
3) 展开剂比如***仿:甲醇:氨水(10:1:),有机溶剂的 极性,甲醇 > ***仿,因此在这个展开剂中,如果极性略大,可 适当降低甲醇比例;如极性太小,可适当增大甲醇比例。***仿: 甲醇:氨水10:1:: 2: 。另外 还有一个问题,这个展开剂中,甲醇用量较小,而甲醇又易挥 发,容易产生边缘效应,要特别注意展开剂的平衡和层析缸的
密封。不同的展开系统意思是其中至少应该有一种溶剂不同 (