文档介绍：现在仪器分析实验
实验四高效液相色谱法测定 V 含量
E
这样误差更小。
6 知识扩展
高效液相色谱仪包括哪几个部分组成？
答：高效液相色谱仪主要由输液系统、进样系统、色谱分离系统、检测器这
四个部分组成，其流程图见图 1。
输液系统包括贮液槽和输液管道、高压泵和梯度洗脱装置。贮液槽，通常是
由玻璃或不锈钢等材料制成的，用来存贮足够数量、符合分析要求流动相的容器。
输液管道是管道内径很小的用于连接高效液相色谱仪各主要流路系统。高压泵是
将流动相在高压下连续送入色谱柱，使样品在色谱柱内完成分离过程。高效液相
色谱仪采用的是往复式恒流泵，是具有输出压力高、流量稳定、流量可调范围宽、
泵内死体积小、具有梯度洗脱及耐酸碱腐蚀、溶剂更换迅速等性能。梯度洗脱装
2现在仪器分析实验
置是在分离过程中，随时间函数程序改变流动相组成，有分低压梯度和高压梯度
两种装置。
图 1 高效液相色仪流程图

进样系统有由进样口、注射器、流通阀和定量管等组成，其作用是使样品有
效地送入色谱柱。进样系统是柱外效应的重要来源之一，为了减少对柱高的影响，
避免由柱外效应而引起峰展宽。进样口要求死体积小，这样能使样品各组分几乎
同时进入色谱柱。
色谱分离系统由色谱柱、柱恒温器组成。色谱柱由柱管和固定相构成，分为
普通分析柱（内径大约 4~5mm）、半制备或制备柱（内径大于 8mm）、窄柱（内
径在 2mm 左右）以及微径柱（内径小于 1mm），内径小的色谱柱相对更省溶，剂
相对灵敏度更高。柱恒温箱是另一个重要的组成，柱温是液相色谱的重要操作参
数。高精度的温度控制对保证色谱柱性能，进行高精度、高重现性的分析是比不
可少的。
高效液相色谱仪的检测器有紫外-可见光检测器、荧光检测器、示差折光检
测器和二极管阵列检测器。
操作高效液相色谱仪时需要注意哪些问题？
答：操作高效液相色谱仪时应注意：
1）配置样品时要严格按照标准配制对照品浓度（低浓度），不可超过或低于一倍。
2）所需玻璃仪器和容器，尽量选用棕色容量瓶进行配制。每次临用前需要用纯
水清洗干净后，再用无水乙醇冲洗三次，阴（烤）干、冷却后方可使用。
3）实验前要检查仪器是否存在漏液现象、压力是否稳定、柱子是否安反。检查
完毕后，打开电脑、工作站电源开关后，再打开泵电源开关、控制面板上泵
3现在仪器分析实验
开关。先用色谱甲醇冲洗柱子，等待机器平稳后，再打开检测器电源开关、
控制面板上检测器开关。30 分钟后方可进针做实验。