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发酵现象实验报告
探究酵母菌在无氧条件下发酵作用产生二氧电炉上煮沸至土豆块熟透,用120目纱布过滤,
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I滤渣反复用肯定量水清洗、过滤2次,合并各次滤液且定容至1000mL
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I即得土豆汁。取肯定体积的土豆汁,在其中加入5%的蔗糖,溶解摇匀
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|,即得种子培育基。将适量种子培育基倒入锥形瓶〔250ml〕
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I用纱布塞塞住管口,并用牛皮纸包扎,置灭菌锅中,于1211下灭菌
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|30min。待灭菌完毕,冷却取出。
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I取6只500mL摇瓶,分别按装液量100、200、300mL配制培育|
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基〔玉米粉6%、豆饼粉2%、麸皮1%〕,加水后略微摇动,使原料潮|
I湿,浸入水中。用8层纱布包扎瓶口,再加牛皮纸包扎。置灭菌锅中,I
I于1211下灭菌30min。|
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I
:将已生长好的菌种,在无菌条件下,根i
1据10%的接量〔8%-12%〕接种到发酵培育基上。|
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I
:将摇瓶固定在摇床上,培育温度为311,|
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I转速为120r/min,培育时间96h。显微镜观测菌丝形态,用试纸测发|
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I
i酵液pH,测定酶活力。摇瓶培育时观测各种摇瓶机的结构。|
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i2•糖化酶活力测定I
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:|
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,先用少量的乙酸缓冲液溶解,并用玻|
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I璃棒捣研,将上清液当心倾入容量瓶中。沉渣部分再加入少量缓冲液,I
|最末全部移入容量瓶中,用缓冲液定容至刻度〔估量酶活力在
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|100~250u/mL范围内〕,摇匀。通过4层纱布过滤,滤液供测定用。
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|于甲、乙两支50mL比色管中,分别加入可溶性淀粉溶液25mL
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|及缓冲液5mL,摇匀后,于401恒温水浴中预热5min。在甲管〔样品〕
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一第4页..共.....
一第4页..共.....
—第3更一共色页.
|中加入待测酶液2mL,立即摇匀,在此温度下精确反应30min,立即各
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I加入氢氧化钠溶液0・2mL,摇匀,将两管取出快速冷却,并于乙管〔空
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I白〕中补加待测酶液2mL。吸取上述反应液与空白液各5mL,分别置于
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I碘量瓶中,精确加入碘溶液10mL,再加氢氧化钠溶液15mL,摇匀塞紧,
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I于暗处反应15min。取出,加硫酸溶液2mL,马上用硫代硫酸钠标准液
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!滴定,直至蓝色刚好消逝为其终点。
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|样品酶活力〔u/g或u/mL〕