文档介绍：基因工程 ic Engineering
李黄金
Email: lihuangjin@
生命科学与生物制药学院
2009
基因工程课程内容
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基因工程概论
分子克隆单元操作
大肠杆菌基因工程
非肠道细菌基因工程
真菌基因工程
昆虫基因工程
高等动物基因工程
高等植物基因工程
蛋白质工程、途径工程
第二章分子克隆单元操作

克隆载体
DNA的体外重组(切与接)
目的基因的克隆

基因操作常用技术
转化与扩增(转与增)
转化子的筛选与重组子的鉴定(检)

基因工程的操作过程
切
接
转
增
检
一、用于基因转移的受体(宿主)
二、转化与扩增
转化与扩增
一、用于基因转移的受体(宿主)
受体(宿主)应具备的条件
各种基因工程受体的特性
实验室常用的基因工程受体
基因工程主要宿主系统
原核细胞(Prokaryotic)
真菌(Fungus )
昆虫(Baculovirus )
高等真核细胞(Eukaryotic)
人(基因治疗)
动、植物(基因农场)
二、转化和扩增(转与增)
转化的原理与技术
转化率
转化细胞的扩增
几个基本概念
pentent ):
受体(宿主)细胞经过一些理化或生物学方法处理后,细胞膜的通透性发生暂时性的改变,成为能允许外源DNA进入的一种生理状态。pentent cell )
转化(transformation ):
外源DNA导入特定受体(宿主)细胞,并使之繁殖和表达的操作。
转化子(transformant):
经转化而带有外源DNA的受体(宿主)细胞。
重组子(binant):
含有重组DNA的转化子。相对于仅含空载体的转化子而言。
1、转化的原理与技术
Ca2+诱导的完整细菌细胞的转化(Ca2+法)
细菌原生质体的转化(原生质体法)
完整细菌细胞的电穿孔转化(电转化法)
l噬菌体DNA的转染