06第六章 免疫学技术 PPT课件.ppt

文档介绍：第六章免疫学检测技术
第一节、抗体的制备
一、抗血清的制备
(一)用于免疫的动物、
主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,
动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,
一般制备免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因动物反应良好,而且能够提供足够数量的血清。
用于免疫的动物应适龄,健壮,无感染性疾患,雄性,
注意饲养,消除动物的个体差异,及免疫过程中死亡的影响。
家兔中纯种新西兰兔最好,一组三只,兔的体重以2~3kg为宜。
(二)免疫途径
多种多样,如静脉内、腹腔内、肌肉内、皮内、皮下、淋巴结内注射等,
一般常用皮下或背部多点皮内注射,。
途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物学活性抗原,一般不宜采用静脉注射。
(三)佐剂
注射抗原时加入的一类能增强抗原的抗原性、刺激机体产生较强免疫反应的物质,称为免疫佐剂。
佐剂的作用:
延长抗原体内存留时间
增加抗原刺激作用
刺激免疫活性细胞增多
促进T细胞与B细胞互作。
不完全福氏佐剂:羊毛脂:石腊油=1: 5,视需要可调整为1:2~9(V/V),
福氏完全佐剂:在每毫升不完全佐剂加入1~20mg卡介苗。
配制方法:
按比例将羊毛脂与石腊油置容器内,用超声波混匀,高压灭菌,置4℃下保存。
免疫前取等容积佐剂与免疫原溶液混合,振荡器混匀成乳状,也可研磨均匀后再边磨边滴加入等容积抗原液,加完后再继续研磨成乳剂,至滴于冰水上5~10min内完全不扩散为止。
为避免损失抗原,亦可用一注射器装抗原液,另一注射器装佐剂,二者以聚乙烯塑料管连接,然后二者来回反复抽吸,约数十分钟后即完全乳化。
(四)免疫方法
抗原剂量:首次剂量为300~500μg,加强免疫的剂量约为首次的1/4左右。
每2~3周加强免疫一次。加强免疫时用不完全佐剂,
,加强免疫时不用。