文档介绍：沙门氏菌检验
范围
本法适用于食品中沙门氏菌的检验。
设备和材料
处微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
冰箱:2℃~5℃。
恒温培养箱:36℃±1℃,42℃±1℃。
均质器。
振荡器。
电子天平:。
无菌锥形瓶:容量500mL,250mL。
无菌吸管:1mL()、10mL()或微量移液器及吸头。
:直径90mm。
无菌试管:3mm×50mm、10mm×75mm。
无菌毛细管。
pH计或pH比色管或精密pH试纸。
全自动微生物生化鉴定系统。
培养基和试剂
缓冲蛋白胨水(BPW)。
四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液。
亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液。
亚硫酸铋(BS)琼脂。
HE琼脂。
木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂。
。
三糖铁(TSI)琼脂。
蛋白胨水、靛基质试剂。
尿素琼脂()。
***化钾(KCN)培养基。
赖氨酸脱羧酶试验培养基。
糖发酵管。
邻硝基苯β-D-半乳糖苷(ONPG)培养基。
半固体琼脂。
丙二酸钠培养基。
沙门氏菌O和H诊断血清。
生化鉴定试剂盒。
检验程序
沙门氏菌检验程序见图1。
报告
沙门氏菌,血清学实验
非沙门氏菌
甘露醇+、山梨醇+
ONPG-
反应结果与左侧描述不符
H2S-靛基质-尿素-KCN-
赖氨酸+/-
H2S+靛基质-尿素-KCN-
赖氨酸+
H2S+靛基质-尿素-KCN-
赖氨酸+
生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统+
TSI,赖氨酸,NA,靛基质,尿素(),KCN
挑取可疑菌落
BS
XLD(或HE、显色培养基)
1mL+SC 10mL
1mL+TTB 10mL
25g(mL)样品+225mLBPW
检样
36℃±1℃,18h~24h
42℃±1℃,18h~24h 36℃±1℃,18h~24h
36℃±1℃,40h~48h 36℃±1℃,18h~24h
图1 沙门氏菌检验程序
操作步骤
前增菌
称取25g(mL)样品放入盛有225mL BPW 的无菌均质杯中,以8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或置于盛有225mL BPW的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min~2min。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需测定pH值,用1mol/±,如使用均质袋,可直接进行培养,于36℃±1℃培养8h~18h。
如为冷冻产品,应在45℃以下不超过15min,或2℃~5℃不超过18h解冻。
增菌
轻轻摇动培养过的样品混合物,移取1mL,转种于10mL TTB内,于42℃±1℃培养18h~24h。同时,另取1mL转种于10mL SC内,于36℃±1℃培养18h~24h。
分离