文档介绍：胃肠病学和肝病学杂志年月第卷第期————.. · ·
其他论著
.肝细胞共培养上清对体外培养细胞的影响
刘永一,胡文君,蔡家利,王英杰
.第三军医大学西南医院感染病研究所,重庆;.重庆理工大学药学与生物工程学院
【摘要】目的以体外培养细胞为实验对象,了解骨髓间充质干细胞与肝细胞共培养上清的生物活性。方法采用
两步酶分离法、全骨髓贴壁筛选法分别分离肝细胞、,按比例直接共培养,收集不同时段的共培养上清,用于人肝细胞系一
细胞的培养。分别以单独培养的肝细胞上清、上清为对照,观察共培养上清对细胞活力和总蛋白合成的影响;同时观察
其对细胞损伤模型的、及细胞凋亡的影响。结果肝细胞上清、上清以及共培养上清对细胞的活力和增殖
均有显著促进作用,表现为增殖活跃,总蛋白合成量增加;加入上述细胞上清的酒精损伤细胞、释放和细胞凋亡
显著低于未加细胞上清的对照组,其中共培养上清效果最为显著.。结论共培养上清对有明显的刺激增殖和损伤

保护作用。
【关键词】间充质干细胞;肝细胞;共培养上清;细胞;细胞活力;凋亡
中图分类号:. 文献标识码: 文章编号:———收稿日期:—

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目前研究表明,问充质干细胞可分泌多种增殖和活力的影响及细胞损伤的保护作用,旨在
细胞因子,能够促进肝细胞增殖及肝脏血管再生¨, 为联合肝细胞治疗肝衰竭提供新的实验依据。
因此国内不少单位已将其用于肝硬化和肝衰竭的临床
材料与方法
治疗。实验研究同时发现,移植共培养的肝细
. 、肝细胞的分离与共培养实验动物
胞可抑制急性肝衰竭的肝细胞凋亡,降低炎症因子水
级大鼠~ 周龄,购于第三军医大学实验动物
平,改善肝生化指标,提示联合肝细胞移植治疗
中心。采用全骨髓贴壁筛选法分离,传至第
肝衰竭可能更有临床价值。迄今为止,有关
代备用。采用体外胶原酶两步灌注法分离肝细胞,用
与肝细胞的相互作用及其共同治疗肝衰竭的具体作用
台盼蓝染色计数测活力,接种于孔板,待肝细胞完全
机制尚不十分清楚。本研究采用共培养策略和体外研
贴壁后换液。与此同时,胰酶消化第代,计数
究方法,观察了肝细胞共培养上清对细胞
并以:的比例加入肝细胞培养板,共培养。每
日收集共培养上清,同时收集单独培养的肝细胞、
基金项目:国家自然科学基金资助项目
上清作为对照,采用×离心和滤膜
通讯作者:王英杰,: .
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短篇论著
大疱性类天疱疮并食管狭窄例临床分析
康凯,赵刚,万晓龙,王进海,董蕾
.西安交通大学医学院第二附