文档介绍：几种茶多酚测定方法的比较
陈惠衡施玲
(湖南农业大学长沙 410128)
摘要用几种不同的测定方法,对不同种茶叶原料提取物中多酚的测定结果进行了比较,提出了几种测定方法之间的差异和规律。
关键词茶多酚、酒石酸铁法、Folin—Denis、HPLC法
茶多酚是茶叶中的主要有效成分,茶中多酚含量的多少,可以反映出茶叶品质的优劣。测定茶多酚的方法很多,但我们所常用的方法有酒石酸铁法和菲林试剂法,特别是前者,以其快速简便,容易掌握重现性好而经常使用。但是在实验过程中,笔者发现,茶的品种不同,用不同的方法测定出来的多酚结果也不同,并且从大量的分析数据中找出了其中的规律。
实验材料与方法
仪器与材料
高效液相色谱(美国Beckman公司)
754紫外-可见分光光度计(上海分析仪器厂)
金农公司生产的速溶绿茶、儿茶素
实验方法
酒石酸铁法见GB 8313-87
Folin-Denis法
原理:Folin试剂能氧化茶多酚和其它还原性物质并显色。
试剂:15%碳酸钠菲林试剂
实验步骤:
(1) 绘制标准曲线:吸取标准单宁酸溶液0-10ml一组,分别置于100ml容量瓶中。各加水75ml,Folin试剂5ml,15%碳酸钠溶液10ml,加水定容至刻度,混匀。在30℃条件下,恒温反应30min,于波长760nm处测定吸光度,计算出线性回归方程。
(2) 样品的测定:-(视样品的含量多少而定),加水溶解后定容至100ml。取1ml试液置于100ml容量瓶中,以下步骤同标准曲线绘制。测定吸光度。利用回归方程计算含量。
(3) 实验注意事项:实验过程中温度和时间对其结果有较大影响,必须恒温、定时。
儿茶素的HPLC分析
样品制备:
a: 精确称取30mg儿茶素样品于50ml容量瓶中,用水稀释,超声5min,冷却定容;
b: ;
仪器:美国Beckman公司生产的HPLC,126泵,168检测器
色谱条件:
× 200mm,5um 波长:278cm
流速: 柱温:30℃进样量:10ul
流动相:A水;B N,N-二甲基甲酰胺:甲醇:醋酸=40:2:1
梯度洗脱:
流动相时间(min)
10
24
A(%)
B(%)
按不同的大小叶种配比所生产的速溶绿茶及茶多酚测定结果见表一。
表一:不同品种各种拼配比例的茶多酚含量
品种拼配比例
多酚含量(%)
桃源小叶种%:云南大叶种%
酒石酸铁法
菲林试剂法
100 : 0
90 : 10
75 : 25
50 : 50
0 : 100
益阳秀眉小叶种%:云南大叶种%
酒石酸铁法
菲林试剂法
100 : 0
8