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沙眼衣原体J型野生株ompA基因重组子构建.pdf

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沙眼衣原体J型野生株ompA基因重组子构建.pdf

上传人:2024678321 2015/2/3 文件大小:0 KB

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沙眼衣原体J型野生株ompA基因重组子构建.pdf

文档介绍

文档介绍:英文缩略词表Ⅲ沙眼衣原体原体网状体主要外膜蛋白可变区聚合酶链式反应非淋萄性尿道炎性传播疾病热休克蛋白免疫刺激序列树突状细胞免疫刺激复合物人类免疫缺陷病毒大肠杆菌畉猤天津医科大学硕士研究生论文甧
中文摘要衣原体是专性细胞内寄生的原核微生物,革兰氏染色阴性,属细菌范畴。衣原体引起的疾病相当广泛:在发达国家衣原体是性传播疾病的首位病原体,由它引起的非淋菌性尿道炎的发病率超过淋病,在性传播疾病中已跃居首位;,至今仍是全球可预防性眼盲的首要原因【浚灰略甯腥径锟傻贾屡!⒀蛄鞑讣Σ荒苷2眩对养殖畜牧业造成很大危害;因此衣原体越来越成为人们关注的重要病原体。人们急切地期待衣原体疫苗的出现以控制衣原体的感染及蔓延,科技工作者在此领域已探索余年,曾试验过多种疫苗,如;灭活或减毒的衣原体疫苗、亚单位疫苗、树突状细胞疫苗龋裆形蕹墒煲呙缥适馈=昀碊疫苗研究的快速发展给衣原体疫蓖研制带来新的希望,随着分子生物学技术突飞猛进的发展,基因工程技术日臻完善,衣原体的生物构成及基因序列日益明朗,衣原体的呙绾苡蟹⒄骨绷Α呙缡窃擞没蚬こ碳际酰ū嗦肽持值鞍椎耐庠椿蛴胂妇柿构建的重组体直接免疫机体,转染宿主细胞,使其表达保护性抗原,从而诱导机体产生特异性免疫的疫苗。本实验的目的是构建畉主要外膜蛋白编码基因与质粒的重组体.,┎牧稀实验中选用的真核表达载体为质粒,目的基因为畉的编码基因,使用的畉标本来源于性传播疾病门诊患者的尿道及富颈分泌物。标本经裂解处理后做为┰┰基因,以此来筛选畉阳性的临床标本;锞蚱序,确定畉临床标本的血清型缓笥么拗菩悦盖形坏愕难G逍吞匾煨砸铮琍扩增此特定血清型的基因:扩增的目的基因与载体经酶切后,连接重组,转化大肠杆菌;最后重组子经抗生素平板筛选、┰錾秆⒚盖屑定后,阳性重组子送测序公司,进行重组子的蛄胁舛ā实验显示:┰@┰霾锞碇凝胶电泳,扩增产物大小约,基因测序确定是畉G逍停籔扩增天津医科大学硕士研究生论文
约,与预期的恢耰编码基因,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,扩增产物片段┰龇椒ㄉ秆≈刈橛鑟,琼脂糖凝胶电泳提示基因存在于质粒中;双酶切法筛选重组子,酶切产生了和两个片段,进一步证明基因存在于质粒中;阳性重组子进行基因测序,。关键词:沙眼衣原体;主要外膜蛋白:
瓹,,甅瑄瑆....’,.痶瑆瓹畉璋
,蟚篶.,铆籱甒琖;瑃’甌琲,.瓸,瓺,.瑆畉.,.甤.,.天津医科大学硕士研究生论文
反复的衣原体感染导致不孕和异位妊蜊引。衣原体感染可经母婴垂直传播,西环素、阿奇霉素割。但在衣原体引起的泌尿生殖道感染中,~%的前言全球可预防性眼盲首要原斟】,目前全世界约有万人因沙眼而失畉引起非淋菌性尿道炎,在男性表现为尿道炎、附睾炎、前列腺炎、引起新生儿结膜炎和肺炎,在患有非淋菌性尿道炎的母亲分娩的婴儿中。病的发病有关【】。瑃感染生殖道还是人类乳头瘤病毒致富颈癌韵协同因子,是人类免疫缺陷病毒Ⅳ腥镜闹匾NO找蛩兀杉略逡丫晌W验费用相比,应用疫苗预防感染比较经济,人们更容易接受。研制有效的然取得了较大进展,但目前还没有比较成熟的疫苗可以用于人体试验,这与畉在人类中的致病性一直备受关注,尤其是近年来,瑃引起的非淋菌性尿道炎的发病率逐渐上升,在某些西方国家,其发病率超过淋病,⒆吹母九形~ィ诰诊于性传播疾病门诊的女性中高达~%。综合症,甚至性功能减退、男性不育等【T谂员硐治9毖住⒛虻姥住前庭大腺炎,%的女性感染上行蔓延引起子宫内膜炎、输卵管炎、盆腔炎,%患有包涵体性结膜炎,%。近年来研究发现同是衣原体属的肺炎衣原体感染与动脉粥样硬化、冠心常见最重要的病原体之一,给人类健康带来很大危害。目前衣原体对某些抗生素是敏感的,可用抗生素治疗衣原体感染,如多女性和%的男性无任何症状浚食中な奔涞囊愿腥荆Mü越哟传染给正在治疗中的性伴,导致治疗失败。科学的治疗方法是对有症状的就诊患者及化验筛查为感染者的性伴同时治疗,但在发展中国家,化验筛查常超出患者的经济承受能力,有些地区难以实现。有研究显示,使应用仅有部分预防效果的衣原体疫苗也能迅速有效地降低生殖道畉的感染率,与化疫苗,以预防世界范围内畉感染的广泛流行,降低发病率,是医学科研工作者必要而紧迫的任务。早在年代,人们就开始研究衣原体疫苗,经过几十年的不懈努力,虽天律医科大学硕士研究生论文
接触传播引起非淋菌性尿道判】。许多因素有