文档介绍：浙江大学医学院
硕士学位论文
沙眼衣原体主要外膜蛋白重组质粒的构建、表达和活性鉴定
姓名:姜慧芬
申请学位级别:硕士
专业:病原生物学
指导教师:潘建平;周林福
20100101
沙眼衣原体主要外膜蛋白重组质粒的构建、表达和活性鉴定中文摘要浙江大学医学院硕士研究生导师病原生物学姜慧芬潘建平教授周林福沙眼衣原体是引起沙眼、非淋球菌尿道炎和许多泌尿生殖道疾病的病原微生物。其个血清型都具有一个主要外膜蛋白唤鲈诮榈糃じ剿拗飨赴墓讨衅鹬匾W饔茫冶旧作为一种重要的免疫原能刺激机体产生细胞免疫和体液免疫,而基因是编的结构基因。因此,根据基因的特异性,制备具有良好免疫原性的抗原,对研究的致病机制、临床快速诊断感染的试剂盒研发、肽芯片及疫苗制备等有重要意义。本文分析了个血清型基因的碱基序列,蚾渌别相比,其表达产物有个氨基酸的差异,因此确定选用疶表位,共个氨基酸。并根据大肠杆菌的偏好密码子优化、设计并合成碱基序列,使得拟表达的目的基因序列能够较好地与原核表达系统相匹配,提高表达效率。通过目的基因片段菇ㄖ刈橹柿2⒆;蟪Ω司螅琁盏急泶铮甈治觯玫搅朔肿恿吭嘉闹刈榈鞍祝⒔《ǖ谋泶镏攴糯笈养,采用柱层析方法纯化重组蛋白,确定了结合缓冲液:/,/蛩兀/Ⅱ
疞疞尿素,疞咪唑,,分别用ィ%,%,%,%,洗脱液梯度洗涤样品,是比较合适的纯化目的蛋白的条件。纯化后蛋白用觳饬俅惭G灞瓯荆舾行晕%,,,,优化密码子,基因表达,蛋白纯化,浙江人学硕貉宦畚中文摘要
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络矽吵钐趁钐学位论文作者签名:啤浙江大学研究生学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书酽日瑚学位论文作者签名:了加加【辏辉聈日参阳或撰写过的研究成果,也不包含为获得浙婆太堂或其他教育机构的学位或证书本学位论文作者完全了解澎江太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江太堂可以签字日期:D辏辉鹿钲本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字日期:将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、
致谢随着本论文的结束,我的硕士研究生生活也画上了句号。在此期间,我衷心地感谢我的导师,他们让我领悟到独立学习和应用技术过程的重要性,使我们在科学研究生涯中迈出了重要的第一步。在此,我衷心地感谢帮助我完成研究的每一位老师和同学。你们让我的学习生活变得更加温暖和和谐。我还要感谢我的家人,没有你们无私的支持和鼓励,我又怎么能将时间都放最后,我谨向所有关心我、帮助我、支持我的每一位朋友表示最衷心的感谢和致敬。
沙眼衣原体主要外膜蛋白重组质粒的构建、表达和活性鉴定实验室诊断方法浙江大学医学院硕士研究生病原生物学姜慧芬潘建平教授周林福副教授年,捷克学者蚉⑾稚逞郯澹晡夜д汤飞凡等分离沙眼衣原体成功,引起了全世界对其进行广泛深入的研究【。沙眼衣原体珻属于衣原体科,衣原体属,包含沙眼型和性病淋巴肉芽肿两个生物型【,可以引起沙眼,还与人类各种泌尿生殖道疾病相关。近年来,由引起的性传播疾病谛矶喙艺約的首位,已超过了淋病和梅毒【,在我国其感染发病仅次于淋病和尖锐湿疣居第三,且其发病率呈逐年升高趋势。它专性细胞内寄生,约%的女性宫颈炎和%的男性尿道感染可无临床症状H绻荒艿玫郊笆敝瘟苹嵋鹉虻姥住⒐倬毖住⑴枨谎住⒉辉胁挥⒁煳蝗焉等疾病,甚至还可以协同人乳头瘤病毒腥竞桶滩〔《经性传播。所以选择快速、灵敏、准确的实验诊断方法尤为重要。目前,对沙眼衣原体的诊断方法主要有细胞生物学法、:由于的专性细胞内寄生,一般培养法不能使其生长,只有在活的细胞内才能增殖复制。常采赴鸋胞分离培养导师学法。.赴镅Х浙江人学硕学位论文引苦
色后在显微镜下观察细胞内有无包涵体。在泌尿生殖道感染的检测方法中,经典的细胞培养法是诊断感染的