第六章第2节基因工程 及其应用.ppt

文档介绍：第2节
基因工程及其应用
:
基因工程:基因拼接技术或DNA重组技术
通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向的改造生物的遗传性状。
一、基因工程的原理
:基因重组
:分子水平
:定向地改造生物的遗传性状。
二、基因工程操作的工具
“剪刀”:限制性核酸内切酶(限制酶)
来源:主要存在于微生物中
种类:目前已知的大约500种
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上将DNA 分子切断。
专一性:
被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?
黏性末端----碱基互补配对
限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程
思考:
被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?
具有
不同的限制酶呢?
形成的黏性末端不同
2、基因的“针线”──DNA连接酶
碱基互补配对
连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,(即生成:磷酸二酯键)使之成为一个完整的DNA分子。
DNA连接酶
DNA连接酶
DNA连接酶的作用过程
3、基因的运输工具——运载体
能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。
有多个限制酶切点,以便于外源基因相连接。
具有某些标记基因,以便进行筛选。
(2)运载体必须具备的条件:
(1)作用:将外源基因送入受体细胞。
(3)种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。
质粒----基因工程中最常用的运载体。
(1)存在于许多细菌及酵母菌等生物中。
(2)质粒的存在对宿主细胞无影响。
(3)质粒的复制只能在宿主细胞内完成。
(4)细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子。
标记基因,便于进行检测。