文档介绍：
输血科相关技术规范与操作规程（SOP）
输血科相关技术规范与操作规程（SOP）
曲靖市第一人民医院科室管理操作规范文件文件编号：QJYY－SXK
第一版
第1次修改责任部门：输血科生效日期：，液体出现透明清澈红色混合凝集红细胞复合物位于凝胶表面和凝胶底部主要参考文献

《全国临床检验操作规程》中华人民共
和国卫生部医政司编东南大学出版社出版发行XX年11月第3版
试剂盒说明书编写者：徐路琼审核者：马丽琼时间：xx
年1月1日曲靖市第一人民医院科室管理操作规范文件文件编号：QJYY—SXK
第一版
第1次修改责任部门：输血科生效日期：xx年1月1日
RH血型鉴定文件页数：共6页RH血型鉴定RH(D)抗原初筛
【标本】抗凝或(和)不抗凝静脉血，制备成2-5%红细胞生理盐水悬液。
【原理】
根据凝集反应原理，当被检测者红细胞上有D抗原存在时，可与IgM抗D产生特异性的抗原抗体反应，出现红细胞凝集现象。凡带有D抗原者称为RH阳性，不带D抗原者称为RH阴性。
【器材】。
【试剂】
单克隆抗D(IgM)血清试剂。
（单克隆抗体）。
【操作】
（一）试管法
，标“-D”，加入1滴IgM抗Do

-5%,混匀。
。
轻轻振揺试管使红细胞重悬，肉眼或显微镜观察有无凝集现象。
记录结果，凝集者为阳性反应，反之为阴性反应。

（二）和
（三）。RH阴性确认
（一）经典抗人球蛋白法
【标本】
抗凝或（和）不抗凝静脉血，红细胞三洗，制备成2-5%红细胞生理盐水悬液。
【原理】
D变异型（弱D或部分D）红细胞与大部分盐水（IgM）抗。试剂通常不产生直接凝集反应，而与部分的IgG抗D血清用间接抗人球蛋白试验反应阳性。当我们初次得到RH阴性结果时，须进行RH阴性确认试验，用三种不同批号的IgG抗D定型，如果全部阴

性方可认为该被检者为RH阴性，否则，只要有一批为阳性，则可认为是D变异型。
【器材】。
【试剂】
（多抗或IgG）.阳性对照【操作】
，标“-Dl”，“-D2”，“-D3”，分别加入3批人源抗D各1滴。
加2-5%，37°C水浴30分钟。
（若不立即洗，则已结合的抗体容易脱离），最后一洗在吸水纸上扣干。
加入抗人球试剂2滴，3400r/min离心15秒，观察结果；
结果判定3支小管都阴性：RH（D）阴性；有任一小管凝集：D变异型。
（二）微柱凝胶法
【标本】
抗凝或（和）不抗凝静脉血，红细胞三洗，%红细胞生理盐水悬液。
【原理】
在微柱凝胶介质中，RH（D）
抗原与相应的不完全抗体在抗人球蛋白的作用下发生凝集反应，形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，该复合物不能通过凝胶间隙而浮于胶表面或悬于胶中；如无

RH（D）抗原，则不能形成红细胞免疫复合物，在一定离心力下，分散的红细胞可以通过凝胶间隙沉于微柱腔底部。
【器材】。
【试剂】
抗人球蛋白检测卡。
%RBC悬液加入标记好的微柱中，立即加入1滴已知抗血清（分别加入3批人源抗D各1滴）；
;
使用专用离心机离心5分钟，2分钟900rpm,,3分钟
1500rpm,观察结果。
【结果判定】
阳性结果：红细胞RH（D）抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。
阴性结果：被检红细胞无RH（D）抗原，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶底部。
【临床意义】
在临床输血中，D变异型人输注D阳性红细胞后可产生抗D抗体。所以受血者若为D变异型，应作RH阴性论，应输注RH阴性血液；供血者为D变异型，应作RH阳性论，不应当输血给RH阴性受血者。
D变异型妇女与RH阳性丈夫生育的婴儿可能发生新生儿溶血病。RH

抗原分型
（一）试管法
【标本】抗凝或（和）不抗凝静脉血，制备成2-5%红细胞生理盐水悬液。
【原理】
根据凝集反应原理，当含