文档介绍：医学微生物学实验指导
西安交通大学医学院
微生物学教研室
第一次实验课内容
实验内容1. 实验目的与要求
实验内容2. 实验室规则
实验内容3. 细菌形态学观察技术
实验内容4. 染色标本的制备—革蓝染色
实验目的与要求
医学微生物学实验课是该专业课程的重要组成部分,指导学生上好实验课是教学过程中的重要环节,学****实验课的目的是:
1. 使学生加深理解并巩固理论知识,学****和掌握有关的实验操作技术,为以后的医学专业课学****打好基础:
2. 在实验中,培养学生观察、思考和分析问题的能力,主动参与实验的动手能力及独立工作的能力。训练学生严格的科学作风、严肃白的科学态度和严密的工作方法。
3. 培养学生在集体工作环境中互帮互让,团结协作,共同完成好实验的精神品德。
为了达到上述目的,提高实验课的教学效果,特提出以下要求:
1. 实验课前做好预****明确本次实验课的内容及其原理、方法及注意事项;
2. 实验中要仔细认真,注意分工与协作,操作实验要按操作步骤进行。学会正确操作手法、准确记录实验结果。示教实验要注意观察,并记录好相关内容;
3. 详细讨论实验结果,提倡同学之间互帮互学,并紧密联系理论课内容。要注意不论实验结果与理论符合与否,都有讨论的价值,并分析其原因,有可能的话还应重复实验;
4. 严格遵守实验室规则,在微生物学实验课上,要树立“有菌观点”,严格掌握和不断完善无菌操作技术。
实验室规则
一、进入实验室须穿工作服、戴工作帽。除必要的书籍文具外,其它个人物品一律不得带入实验室。
二、在实验室内,禁止饮食、吸烟及与学****无关的其它活动,不得大声喧哗或嘻戏。
三、未经老师许可,不得擅自搬动实验器材及示教物品,不准随意摆弄和旋转实验仪器上的开关及旋扭等。
四、按照实验要求,在老师的指导下,主动安排要进行的实验,认真进行实验操作,严格遵守无菌操作规程,争取顺利地完成实验。
五、实验中使用完毕的器材和试剂,必须放回规定的位置。废弃物必须按规定进行处理或归放于指定的容器内,不能随便乱丢乱放。
六、实验中万一有菌液打翻、有菌材料污染桌面或衣物、割破手指等意外情况,应及时报告老师进行处理,切勿自作主张不按规定处理。
七、爱护实验室内一切设备、挂图、仪器。注意节约使用消耗材料及药品试剂,注意用电安全及节约水电。
八、实验结束,要清理桌面,将实验器材放回原处。值日同学要搞好实验室的清洁卫生,保持室内整齐,离开实验室前要关好门窗、水、电,并将手洗干净。
九、未经许可,不得将实验室内任何物品带出实验室。
实验一细菌形态学观察技术
将细菌培养物或含菌标本材料制备的染色标本片,置显微镜油镜头下,可以观察到细菌的形状、大小、结构、排列及染色特性等,了解这些特征有助于鉴别各种细菌。
一、显微镜油镜头的使用与保护
【使用原理】
用油镜观察标本、是在使用高倍镜的基础上,采用同玻璃折光率相似的油状物(如香柏油、液体石腊等),滴加在标本与油镜头中间,以避免光线散射,提高显微镜的清晰度和分辨能力。使观察物象更加清楚明了。
【操作方法】
1. 调试:打开电源,先采用低倍镜,使视野达到清晰光亮。
2. 加油:双手向上转动粗螺旋,使镜筒上升,将标本片固定于载物台上,使染色面对准集光器央,加镜油于标本面,调换油镜头对准标本面。
3. 调焦点:用左手向下轻转粗螺旋,使镜筒下降,同时眼睛从右侧观察下降程度,待镜头入油后接触上玻片,用眼观目镜,反转粗螺旋,使镜筒慢慢上升,待看到模糊物象时,改用细螺旋上下调节,使物像达到完全清晰为宜(一般转动细调节前后半圈)。
4. 观察:观察时只使用细调。需改换视野时,右手操纵推进器,左手转动细螺旋,做到配合自如。并养成左眼观察,右眼绘图的****惯。
【油镜头的保护】
油镜头使用完结后,必须用擦镜纸滴加少量二甲苯将油擦洗干净(二甲苯用量宜少,以免镜片间粘胶溶解)。下降集光器,半接物镜转成“八”字,再下降镜筒,轻触镜台表面,双手平持显微放入镜箱,避免直射日光,置于干燥处,以防受潮。
【注意事项】
1. 使用直筒显微镜观察标本时,必须两眼同时睁开,训练使用左眼观察,右眼绘图。如用油镜头观察,勿将镜身歪斜,避免镜油流出片面。
2. 观察染色标本时,光线宜强,可上升集光器,开大光圈。观察不染色标本时,光源宜弱,可下降集光器,缩小光圈。
3. 使用完毕,一定擦去镜油。
二、细菌不染色标本
不染色的细菌和标本镜检,虽可观察细菌在自然生活状态下的大小、形态、活动等,但主要用于观察细菌的动力。
(一)悬滴法
【材料】
1. 细菌:枯草杆菌8~12小时肉汤培养物。
2. 凹玻片,盖玻片,凡士林等。
【方法】
1. 取凹玻片一张,于