文档介绍：11  概概述述 
22  基基本原理本原理 
33  荧荧光定量光定量分析分析 
荧光法
44  仪仪器与技器与技术术 
55  小小结结
第一节概述
n 荧光:荧光:分子吸收了较短波长的光(通常是紫外和可
见光),在很短时间内(几纳秒至几微秒)发射出较
照射光波长为长的光。
n 荧光光谱荧光光谱::是发射光谱,包括激发光谱和发射光
谱,发射光谱有时也称为荧光光谱。
n 荧光分析荧光分析法:法:基于对化合物的荧光光谱测量建立
的分析方法
光照
分子基态激发态
辐射跃迁荧光
若光源是:
由荧光波长可确定物质分子
可见­ 紫外  光源分子荧光分析法具有结构
由荧光强度可测物质的含量
原子特征光谱作光源原子荧光分析 
XX 射线作光源  XX 射线荧光分析
n 特点:特点: 
11 、灵敏度高:  10 ­8  ­  10   ­1  0 g/ml (紫外可见 1 0 ­­ 4 ~1 0 ­­ 7 g/mll ) 
22 、选择性强 
33 、所需试样量少:广泛用于痕量分析,适用于生物体液中
药物或代谢产物的分析 
44 、提供较多的物理参数:激发光谱、发射光谱、荧光强
度、量子产率、荧光寿命等 
55 、干扰因素多、实验条件要求严格:洗衣粉、橡胶管等
(影响准确度与精密度,限制了某些实际应用)
荧光分析法与可见­­  紫外,红外比较: 均属于分子
光谱
荧光可见­­  紫外,红外
本质发射光谱吸收光谱
灵敏度  10 ­8  ­ ­ 10 ­1  0 g/ml                   10 ­5  ­ ­ 10 ­7  g  /ml 
选择性高一般
第二节基本原理
一一. .激激发与驰发与驰豫:豫:
(一) 分子的激发过程:
根据电子跃迁时吸收光子能量和电子自旋状态的不同,
可产生各种电子激发态。
光谱中电子能级可分为两组: 
1、单线态  : 用S S 表示,总自旋S= 0,  谱线多重性 
M=2S+1=1,  两个电子自旋相反,包括基态单线态与
激发单线态。 
2、三线态  : 用T 表  示,总自旋S= 1,  谱线多重性 
M=2S+1=3,  分子受激后产生电子自旋反转,这种受
激态为三线态。三线态能级常较相应的单线态能级
低。
基态单线态(S  0 ), 激发单线态(S* ),  激发三线态(T *) 
电子分布如下:
解释:(1 )  大多数分子含偶数电子,基态时,这些
电子成对填充在能量最低轨道,自旋方向相反,电
子净自旋等于0 (  S= 0),  因此是抗磁性的,其能级
不受外界磁场影响而分裂。这种电子能态为单线
态,其多重性  M=2S+1=1。 
(2 )  当基态分子的一个电子吸收光能而被激发的过
程中,自旋方向不变,此时的激发态为激发单线
态。
(3 )若  一个电子在激发态上自旋方向有改变,即
自旋方向相同,则分子中电子的净自旋(S= 1),  分
子在磁场中受影响而分裂,M= 2S+1=3,  这种受激
态为三线态。
(4 )  体系从基态到单重激发态的跃迁(S  0→    S*1  , 
S 0 →  S*2   ), 同时伴随振转能级跃迁,产生相应
的分子紫外-可见吸收光谱。
(5 )  体系从基态到三重态的跃迁(S  0→    T*  )) 是一
种禁阻跃迁,,  但单重激发态可通过系统间交叉跃
迁,改变电子自旋方向,跃迁到相应的三重激
发态(S *1 →    T*  1  )) 。