文档介绍：第三章真菌感染实验诊断
第一节真菌的基本特性
真菌是一大类具有典型细胞核,不含叶绿素,不分根、茎叶的真核细胞型微生物。
整理课件
一、真菌的形态特性
(一)单细胞真菌呈圆形,如酵母菌。
(二)多细胞真菌由菌丝和孢子组成,
称丝状菌或第三章真菌感染实验诊断
第一节真菌的基本特性
真菌是一大类具有典型细胞核,不含叶绿素,不分根、茎叶的真核细胞型微生物。
整理课件
一、真菌的形态特性
(一)单细胞真菌呈圆形,如酵母菌。
(二)多细胞真菌由菌丝和孢子组成,
称丝状菌或霉菌。
整理课件
菌丝和孢子的形态因菌而异,是鉴定
真菌的重要依据。孢子又分为多种,
如叶状孢子、分生孢子和孢子囊孢子
等。
整理课件
二、真菌菌落特性
真菌培养要求不高,常用沙氏
(Sabouraud)培养基(含1%蛋白胨、
4%葡萄糖或麦芽糖、2%琼脂)培养,
适宜温度22℃—28℃,但深部真菌为
37℃。形成三种菌落,菌落形态是
鉴别真菌的重要依据。
整理课件
落,形态与细菌菌落相似,较大,
表面光滑湿润柔软、边缘整齐,
如新生隐球菌。
整理课件
,
形成假菌丝,伸人培养基中。
整理课件
落。菌落呈棉絮状、绒毛状,并
产生不同的色素,如皮肤癣菌。
整理课件
第二节标本采集及检验程序
一、临床标本的采集
(一)临床标本类别
:毛发、
指(趾)甲、皮屑等。
整理课件
:生殖道
分泌物、耳垢、痰、粪便、尿
液等。
整理课件
:体液包括胸水、
腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。
。
整理课件
(二)采集标本注意事项
应采取不同的临床标本。怀疑为浅
部真菌感染如体癣,应刮取病变边
缘的痂、皮屑,发癣应取病发。深
部真菌感染应取血液、脑脊液、脓
汁等。
整理课件
标本须在用药前采集,对已用
药者则需停药一段时间后再采
集标本。
整理课件
脊液标本5ml,胸腔液20ml,
皮屑标本两块,活体组织两份
(一份送病理科检查,一份作
镜检和培养)。
整理课件
,
尤其是采集血液和脑脊液标本,
要避免污染杂菌。
本最长不得超过2h。
整理课件
第三节真菌检验
一、标本直接检查
(一)显微镜检查
直接镜检对真菌病的诊断较细菌更为重要。
许多真菌标本不需染色即可直接镜检,如癣病
标本多用KOH湿片检查法,即取病发或病损部位
皮屑、甲屑置于载玻片上,加1滴10%-20%KOH
液,然后加盖玻片并微微加热,使标本组织溶解
透明,在显微镜下可观察到真菌的孢子和菌丝。
整理课件
直接镜检的意义
直接镜检阳性表示:
①有诊断意义,如浅部真菌病等;
②看到的就是真菌的形态,可确定某
些致病性真菌的属或种,如假丝酵
母菌的厚膜孢子等;
整理课件
③判断某些真菌种的致病性等,如
皮肤癣菌、曲霉等。
整理课件
直接镜检也有局限性:
①阴性结果不能排除真菌感染;
②有假阳性结果。
因此,对直接镜检可疑结果应
作复查或用其他检验方法鉴定。
整理课件
(二)抗原检测
常用的方法有胶乳凝集试验、
ELISA、半定量放射免疫法。
均应设对照,防止发生假阳
性和假阴性。
整理课件
用胶乳凝集试验检测标本中的白
假丝酵母菌甘露聚糖抗原。
用胶乳凝集试验和ELISA检测血
清和脑脊液中的隐球菌多糖荚膜抗
原,在治疗前检测非常敏感特异。
整理课件
用半定量放射免疫法检测血清、
尿液和脑脊液中荚膜组织胞浆菌循
环多糖抗原,可快速诊断。
整理课件
二、真菌的分离培养
真菌培养是目前鉴定真菌的惟一
方法。培养真菌的温度为28℃,
但深部真菌为37℃。菌落是鉴
别真菌的方法。注意以下几点:
整理课件
①菌落性质:酵母菌还是霉菌;
②菌落大小,病原性真菌菌落小,
而条件致病性真菌菌落大;
整理课件
③菌落颜色病原性真菌颜色淡,
污染真菌颜色深;
④致病性真菌菌落下沉,有时使
培养基开裂;污染性真菌菌落
不下沉,很少引起开裂。
整理课件
三、真菌的生化反应
用于主要深部感染真菌如假丝酵
母菌、隐球菌等。
(醇)类发酵试验37℃孵育,
观察糖发酵情况。
整理课件
与已融化的固体同化碳源培养
基(45℃)混合,然后在培养基
上分别加糖,置25℃孵育观察
结果。若24h后无变化可重复
加糖。如能同化周围有生长圈,
否则无生长。
整理课件
验相