文档介绍：高效液相色谱仪的使用及运行性能测试
实验目的
了解高效液相色谱仪的基本原理和结构。?
掌握高效液相色谱仪的基本操作方法。
掌握测试高效液相色谱仪运行性能的指标和方法,验证各部件及整机的性能。
实验器材?
高效液相色谱仪,LC-A高效液相色谱仪的使用及运行性能测试
实验目的
了解高效液相色谱仪的基本原理和结构。?
掌握高效液相色谱仪的基本操作方法。
掌握测试高效液相色谱仪运行性能的指标和方法,验证各部件及整机的性能。
实验器材?
高效液相色谱仪,LC-ATvp高压泵、SCL-10Avp程序控制器、SPD-M10Avp二极管阵列检测器、
CTO-10Asvp温度控制器。Shim-packVP-ODSC18150x分析柱、20|jl进样器、AS3210型超声波发
生器。无水甲醇和双蒸水各500ml(脱气处理)、萘、咖啡因(均为色谱纯或分析纯)。
实验原理
高效液相色谱法是一种现代液相色谱法,其基本方法是用高压输液泵将流动相泵入装有填充剂的色谱柱,注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后,各成分先后进入检测器,用记录仪或数据处理装置记录色谱图并进行数据处理,得到测定结果。由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相,本法具有分离性能高、分析速度快的特点。
描述
高效液相色谱仪由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理系统组成。LC-2010和
Agilent1100型为单泵型,适于单一流动相的洗脱;LC-10Avp型为双泵型高效液相色谱仪,适于程序
洗脱。单泵型高效液相色谱仪的结构示意见图9-1。
实验步骤?
(一)高效液相色谱仪的基本操作步骤(以岛津LC-10A为例)
依照顺序开机,自检完毕后进入操作模板;
设定洗脱程序、检测器的条件及测定报告;
完成实验过程,打印试验结果,依照顺序关机。
(二)性能测试
高效液相色谱仪的性能检查分为单个部件的验证和整机验证。验证时一般先验证泵、柱温箱、自动进样器的性能,接着是检测器的性能,最后是整机的性能验证。验证目的是检查并确认高效液相色谱仪运行性能是否符合要求。
验证标准
按照中华人民共和国国家计量检定规程,高效液相色谱仪各验证部件的验证项目
的合格标准见表9-1。
表9-1高效液相色谱仪各验证部件的验证项目的合格标准
验证部件验证项目合格标准
流量设定值误差Ss
输液泵
流量稳定性误差SR
柱温箱设定值误差ATs<±2°C
柱温箱
柱温箱控温稳定性Tc
<1C
自动进样器进样量准确度误差
<±2%
基线噪声
<2x1Q+5AU
检测器最小检测浓度
<1x(萘的甲醇溶液)
基线漂移
<5x
整机性能定性测量重复性误差
RSD<%
验证步骤
(1)输液泵泵流量设定值误差SS、流量稳定性误差SR的检定
表9-2流量、次数、收集时间表
333
流量设定值(mL/min)测量次数流动相收集时间(min)1Q55
Ss=(F.-F0/F5X1OO% (1)
……⑵.
式中=Ss:流量设定值误差(%););
Sn:流量稳定性误差(%);F:同一组测量值的算术平均值('1);
Em:同一组测量中流量最大值('1);队:同一组测量中流量最小值
("