文档介绍：实验二十五
微生物乳酸发酵的观察
微生物乳酸发酵的观察
目的要求
实验材料
试验程序
思考题
目的要求
了解在日常生活中利用乳酸发酵腌制泡菜、制造酸奶的作用。
利用原料上天然存在的乳酸细菌进行乳酸发酵腌制泡菜。
对乳酸发酵的条件、产物及作用微生物作进一步的了解。
实验材料
萝卜或包心菜、大头菜kg。
无菌的150mL带发酵栓的三角瓶。
菜板、小刀、烧杯、试管、吸管、pH试纸、食盐、粗天平、100mL量筒
10%硫酸
2%高锰酸钾
含氨的硝酸银溶液
1×4cm滤纸条
试验程序
泡菜乳酸发酵的装置
乳酸生成的检验
乳酸细菌的观察
试验程序 1 (泡菜乳酸发酵的装置)
自来水100mL,食盐7g放入烧杯中加热煮沸10min,把烧杯盖住,冷却.
将带菌萝卜洗净,带皮切成长方块,注意切块不宜太小,然后放入灭菌的三角瓶内,约占瓶容量的1/2。
将已冷却的食盐水注入三角瓶使淹没萝卜块,约至瓶高的2/3处。然后在发酵栓内加水至玻管口,将三角瓶塞好,以隔绝空气(见图)。
放入300C温箱中进行发酵,一周后检查实验结果。
试验程序 2 (泡菜乳酸发酵的装置)
试验程序 3 (乳酸生成的检验)
打开发酵栓,嗅闻瓶中有无臭味。
用pH试纸测定pH值。
用10mL吸管吸取发酵液10mL,注入空试管中。
加入10%H2SO41mL,再加入2%KMnO4溶液的1mL,此时乳酸即转化为乙醛。
取率纸1条,在含氨的硝酸银溶液中浸湿,横搭在试管口上。
将试管徐徐加热至沸,使乙醛挥发,如管口滤纸变黑,即证明有乳酸生成,此变化反应如下:
试验程序 4 (乳酸生成的检验)
反应方程式
2KMnO4+3H2SO4
K2SO4+2MnSO4+3H2O+5[O]
5CH3CHOHCOOH+5[O]
5CH3CHO+5CO2+5H2O
CH3CHO+2Ag(NH3)2OH
CH3COONH4+2Ag+2H2O+3NH3
试验程序5 (乳酸细菌的观察)
取泡菜水1环涂片、干燥、固定、石炭酸复红染色1min,水洗干燥。
油镜下检查,无芽孢的细长杆菌是乳酸杆菌,也可能有乳酸链球菌的出现。