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水稻紫黑色颖壳Pbh基因的遗传分析与克隆.pdf

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水稻紫黑色颖壳Pbh基因的遗传分析与克隆.pdf

上传人:779277932 2012/2/7 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:中国农业科学院学位论文水稻紫黑色颖壳虻囊糯ǚ治鲇肟寺博士研究生:张玲指导教师:翟虎渠教授申请学位类别:理学博士业:生物化学与分子生物学研究方向:水稻功能基因组学培养单位:作物科学研究所研究生院编号:专提交日期月
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聊躲帆冽印易月个弓研究生签名:驾艮影卜独创性声明关于论文使用授权的声明时间:阳年口厶月年。占月乙\时间:矽本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:
‘\\、⒅,叶兴录厥论文答辩时间地点年丈衔:分作物科学研究所重大工程楼阅主席≯贝口/一,●
摘要命名为伪此牡庀宰哟τ幸坏ゼ罨耐槐銫耇,造成第位的缬氨酸涑>遇#耐庀宰又杏碱基的插入,与最近发表膨剧群基因为等位基因。为了确定控制紫黑色颖壳性状的基因,我们分别构建厂虰两个基因的互补载体、过表达载体和干扰载体。但由于实验材料本研究利用一个天然的水稻紫黑壳突变体2牧希猿墒焓逼谟笨侵猩氐某煞趾秃进行了初步分析,并通过图位克隆、荧光定量确椒ǚ治龊脱芯苛说骺刈虾谏笨腔蛞及类黄酮代谢途径相关基因在水稻颖壳中的表达情况,主要研究结果如下:虾诳峭槐涮錰来源于大田种植的咏蛔楹系母吆蟠禾澹且惶然的自发突变体。该突变体在种子蜡熟期后;ê颖壳变成紫黑色,之前保持绿色。正在成熟的穗子呈现顶部紫黑色和基部绿色的混合色,到种子完熟期以后所有饱满的种子完全变成紫黑色颖壳且易落粒。我们利用紫黑色突变体与颖壳颜色正常品种巴利拉杂交×,构建遗传群体。通过遗传分析发现紫黑壳突变体性状受单显性基因控制,此外调查发现在材料中还存在调控种子果皮颜色的基因,但与紫黑色颖壳基因不连锁,两个性状可以看作是相互独立的基因来分别进行研究。而且所有的分离世代中的紫黑壳表型的单株都极易落粒,我们推测在突变体中落粒性状与紫黑色颖壳性状可能紧密连锁,或是由同一个基因决定的多种性状。与野生型相比,除了紫黑壳突变体穗长略长,千粒重有所增加外,其他农艺性状没有显著差别。米贤夥止夤舛燃品ê透咝б合嗌追ú舛ㄒ吧秃屯槐涮宄墒炱谒居笨侵械幕ㄇ素和原花青素含量和成分的结果表明,与黄壳野生型材料相比,紫黑色颖壳突变体中可溶性的原花青素含量明显下降,而不可溶的原花青素水解后产生的花青素含量和成分没有显著差别。以原花青素的两个单体儿茶素和表儿茶素为标准品,用反相测定可溶性原花青素结果表明,紫黑壳突变体中几乎不含有表儿茶素或含量极少未检测出,其它可能属于原花青素多聚体成分,在同等检测条件下,峰图面积也显著变少,表明原花青素的总含量明显减少。罛的和群体将显性紫黑壳基因精细定位在第旧宄け鄱区间内。该区间共有个ü愿们尾庑蚍⑾郑琌异亮氨酸淮送猓琌本紫黑壳突变体和黄壳野生型挠俗橹缀只檀芰Φ投延谑敌幸糯;形吹玫以黄壳野生型为受体材料的互补和过表达单株:以紫黑壳突变体为受体材料的干扰单株。仅得到了以丽江新团黑谷、日本晴、J芴宀牧系母扇胖仓辏喙氐氖笛檎诮兄小糜ü。而基因在成熟期的穗部组织表达明显高于其他组织,且突变体中表达量高于野生型。ü岳嗷仆M揪断喙氐幕虮泶锓治龅姆⑾郑骺乩嗷仆N镏噬锖铣傻墓丶峁够因琌,琌,琌诔墒炱谧虾诳峭槐涮甯鞲鲎橹斜泶锷调;参与类黄酮转运途径中的基因,主要是在紫黑颖壳突变体中高表达,但是同一基因在植株的局部组织镀蚓中又以野生型的表达量较高;基因琌和诿缙诘囊吧陀胪槐涮逯斜泶锊钜觳幻飨裕诔墒炱谕槐涮宓囊吨蠴,琾,
黄酮途径相关基因琌,伪誷、阅藈、仍:—饿⒊痣居琌琌高于突变体,而茎中却低于野