文档介绍：中国农业科学院业:生徽学位论文鰎苜蓿盲蝽两种气味结合蛋白功能的初步研究师:张永军研究员养单位:植物保护研究所密级:论文编号:硕士研究生:张雪莹指导教申请学位类别:农学硕士专研究方向:昆虫化学生态学与分子生物学培研究生院提交日期一.■■觥鰎▲■■’
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研缎、、答辩委员会签名表论文题目苜蓿盲蝽两种气味结合蛋白功能的初步研究昆虫化学生态论文作者张雪莹专业生物安全研究方向与分子生物学指导教师张永军研究员培养单位芯克⒅行植保所姓名职称单位签名评王琛柱研究员中国科学院动物所农业昆虫学人吴青君副研究员中国农科院蔬菜所答郭予元中国农科院植保所北京农林科学院张芝利植保环保所戈峰辩张青文教授中国农业大学委高希武农业昆虫学∥员张友军王振营吴孔明农业昆虫学。会议记录厥陆宴辉副研究员论文答辩时间地点年号中
研究⋯:派鹞弘沥:帆独创性声明关于论文使用授权的声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。年本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签导师签名时间:名.:月日●‘
摘要苜蓿盲蝽且恢种匾5呐┮岛Τ妫3T谖夜坪恿饔蛎耷和西北内陆棉区对棉花造成危害。另外,苜蓿盲蝽的食性很杂,还能够为害黎科、豆科、葫芦科、亚麻科等作物和牧草等。在昆虫有效感受外界信息物质的过程中,昆虫的嗅觉系统发挥了重要的作用,能够保证昆虫准确觅食、寻找配偶和产卵场所等。昆虫的嗅觉识别过程复杂,包括气味结合蛋、化学感受蛋⑿畔⑺亟岷系癐刍、气味降解酶以及气味受体榷嘀值鞍撞斡搿F渲欣コ嫫督岷系鞍资悄壳把芯康囊桓鋈鹊恪R云结合蛋白基因为靶标,对昆虫嗅觉行为进行调控是害虫治理的一条潜在有效途径。本文以苜蓿盲蝽气味结合蛋白和为研究对象对其功能进行了初步研究,主要取得利用同源建模的方式对苜蓿盲蝽和的三维结构以及识别气味分子的结合位点进行了预测。结果表明,这两个气味结合蛋白的结合口袋主要是由疏水性氨基酸构成,但在结合口袋的内部也存在亲水性的氨基酸。模型显示,華岷峡袋更大,同时口袋内部的疏水性的氨基酸也更多。据此推测能够识别结合更多的气味分子,而可能对气味的识别更具有专一性。气味结合蛋白的疏水性氨基酸可能与疏水性的气味分子的结合作用相关,亲水性的氨基酸残基则可与气味分子的官能团形成氢键。将苜蓿盲蝽触角中特异性表达的基因进行了原核表达,纯化的重组蛋白与种气味分子的进行荧光配体结合实验。结果表明,与结合比较强烈的气味分子多为绿叶气味物质。其中结合能力最强的几种气味分子包括月桂酸乙酯、乙酸叶醇酯、法尼醇、异癸醇和合┤。而一些报道的盲蝽科性信息素类似物与的反应并不强烈,丁酸己酯的结合常数为疞,。据此,推测可能是一种普通气味结合蛋白。采用椒ú舛塑俎Cを泶疲鄢沙娲ソ嵌圆煌斗肿拥缟矸从Α=峁⑾郑南喽灾到洗蟮亩辔H├┤谆郊兹⑽烊⑿寥┑取T诜从值较大的前个标样中,包括秩├唷种酯类、滞@唷种醇类、滞樘F渲包括置藁ɑ臃⑽镆约耙驯ǖ赖种性信息素类似物成分。同时在从χ写菩鄢娣从差异极显著的制斗肿又邪年二甲基苯甲醛、辛醛、苯甲醛、十一烷、捍肌⑿镣椤十二醛、水杨酸甲酯。使用显微注射法对苜蓿盲蝽的气味结合蛋白基因成功进行了扇拧=峁表明,显微注射小时后干扰后的昆虫相较于未干扰的昆虫对于性信息素类似物的应明显下降,并且雄虫比雌虫下降的更多。检测发现,注射能俎Cを淼的的表达量被降低至极低水平。采用实时荧光定量检测结果也证实基因被有效沉默。解析昆虫气味结合蛋白在嗅觉过程中的功能,以为潜在作用靶标,干扰害虫的嗅觉感知来有效控制昆虫的行为,是一种治理害虫的有效策略。本研究结果有助于阐明苜蓿盲蝽以下主要结果。疞和疞,丁酸丁疞、
关键词:苜蓿盲蝽,气味结合蛋白,三维结构模拟,荧光竞争结合实验,琹Ⅲ扇识别气味物质的分子基础,可以帮助我们设计新型引诱剂或驱避剂,为开创害虫治理新途径提供理论基础。‘
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目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯