文档介绍：中国农业科学院·●⋯达分析茶树越冬芽休眠与萌发相关基因的分离与表业:茶单位:茶叶研究所博士研究生:王新超指导教师:杨亚军研究员申请学位类别:农学博士学方向:茶树育种学研究生院提交日期月究养专研培密级:论文编号:凇靗■●●·’、
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新躲博帆刎㈨舢研究生签名:兰ブ独创性声明关于论文使用授权的声明动年掠∪本人声明所星交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。时间:
忱\嬲万啦陬≯锄\\谧异、之私钐埏砺中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表博导团硕导团论文题目茶树越冬芽休眠与萌发辑鼗敬驣的分离与表达分析王新论文作者专业茶学研究方向茶树育种学超指导教师杨亚军培养单位芯克⒅行茶Ⅱ硕职称单位签名姓名导师教授杨贤强研究所博导口五硕导口滕元文席骆耀平中国水稻研究所分子生物学魏兴华研究员中国农业科学院茶叶阮建云辩成浩委陈亮员韩文炎会议记录厥孙逸钊月茶叶所论文答辩时间地点评浙江大学梁月荣人鲁成银答园艺参主一、、、~’,/
摘要别足低温的抵抗能力,安全越冬。在春季环境条件合适时,芽打破休眠,开始新一轮的生长周期。本研究以特早生品种龙井和晚生品种政和大自茶为研究对象,采用抑制消减杂交技术,构建了銎分中菝哐亢兔榷康对正、反向—目猓秆〕鲆慌胄菝呋蛎确⒂泄氐幕因,并克隆了与休眠或萌发相关的龌虻腸ǔぃ芯苛个基因和一批与生长素相关的基因在茶树芽休眠到萌发后不同阶段的表达模式,为揭示茶树越冬芽休眠及其解除的分子本质经过差示筛选、测序、拼接,获得了条独立摹因。生物信息学分析结果发现在萌动芽文库中,以核糖体蛋白、组蛋白、叶绿素痓结合蛋白等基因的表达丰度较高:在休眠芽文库中,以已经登录的茶树休眠芽蛄小⑼阉亍⒗溆盏嫉白缘然虻谋泶锓岫冉细摺能推测及归类结果发现休眠芽和萌动芽在基因表达谱上存在较大差异。克隆了茶树生长素抑制蛋白基因,编码的蛋白质具有家族的保守结构域,为水溶性的非分泌型蛋白质,没有信号肽及剪切位点。随着休眠程度的加深,表达量增加,在休眠阶段的表达量高于萌发阶段。克隆了茶树细胞周期蛋白基因和细胞周期素依赖激酶基因。编码的蛋白质具有细胞周期蛋白的特征信号序列、保守的细胞周期蛋白盒区域和的典型三维结构。基因编码的蛋白质具有奶卣餍藕判蛄小⒈J亟峁褂蚝虲的典型三维结构。基因表达结果表明,和的表达是生长期高于休眠期,在由休眠向萌发转变阶段它们的表达量最高。说明这龌蛟诓枋餮啃菝呓獬墓讨蟹⒒幼胖匾5淖饔谩与生长素相关基因的片段在茶树芽休眠不同阶段的表达模式研究结果表明:肷に叵煊σ子同源的鮁片段中,有醯谋泶锪渴切菝咂诟哂诿确⑵冢硗鈒条则相反。肷素原初反应基因同源的鮁片段的表达模式存在差异,其中与吹腅在休眠阶段上调表达,休眠解除以后下调表达。而与吹条琹条在萌发阶段有一个表达高峰,而在休眠期和萌发以后,表达量都下降。另外鮁在深休眠期的表达量最高。素抑制蛋白类基因在休眠期的表达量高于萌发以后的阶段。肷に亟岷侠嗟鞍淄吹牟枋表达量在萌发期高于休眠期。肷に啬谙蛟耸湓靥寤蛲吹腅片段在深休眠期的表达量最高。条受生长素调控的硐殖霾煌谋泶锬J剑に赜盏急泶锏腅在休眠期的表达量高于萌发期及随后阶段,而另外跏苌に匾种频腅片段在萌发期的表达远远高于休眠期。这些结果初步说明生长素促进腋芽的休眠。关键词:茶树啃菝撸种葡踉咏唬に匾种频鞍谆颍赴芷诘鞍基因,细胞周期蛋白依赖激酶基因,生长素相关基因,荧光定量茶树作为一一种多年生植物,在每个年生长周期中,阱。芽会以休眠的形式来提高对外界逆境特奠定基础。
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录目英文缩略表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章茶树休眠芽与萌动芽抑制消减杂交文库的构建与质量分析⋯.摘#第一章芽休眠的定义与分类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯....⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..芽休眠的影响因素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一芽休眠调