文档介绍：研究方向:分子病毒学与免疫学培养单位:哈尔滨兽医研究所中国农业科学院研究生院提交日期:月
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.\\.飞煳≈冬高‘\\励飞中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目蓝舌病病毒型鞍椎タ寺】固宓闹票讣捌淇乖砦坏募王凌凤专业研究方向和分子免疫学指导教师吴东来研究员培养单位芯克哈尔滨兽医研究所姓名位兽医传染病及论文作者预防兽医学其病原生物学硕职称单签名导师评宋桂敏教授天津农学院博导团硕导口中国农业科学院特产研人闫喜军研究员究所辩军事医学科学院微生物祝庆余微生物学席博导匦流行病研究所宁宜宝中国兽医药品监察所东北农业大学基础兽医学郑世民答黑龙江省畜牧兽医局动物医学李书华周建华委相文华步志高博导回会议记录厥郭东春论文答辩时间地点年展跏抟窖芯克醣ǜ嫣阅主贝、灰口/刀‘●
功年‘月名日王壤乱时间:加,阦月形日王婧时阃:么纱旯日独创性声明关于论文使用授权的声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:
为唧卜限鳌摘要将蚿分别转化大肠杆菌,用诱导大肠杆菌表达重组蛋白蓝舌病珺是一种由蓝舌病病毒珺鸬耐ü怏等昆虫传播的非接触性病毒性动物传染病。主要感染反刍动物,为畜牧业带来巨大的经济损失,是国内外动物疫病防疫监测的重点。全世界共分离到至少个血清型腋餍臀饰藿徊娣应,因此快速的血清型检测方法的建立是预防本病的关键,以便针对当地流行的血清型选择相应疫苗控制本病。根据幸逊⒈鞡⒊腖蛐蛄杓苐对引物,从感染细胞中提取病毒琑┰鯨颉@肂コ娓俗床《颈泶锵低潮达鞍住=獿蚩寺≈羛供体质粒,构建重组供体质粒V刈楣体质粒转化惺芴赴竦弥刈楦肆.Ⅵ,=刈楦肆WH維丹昆虫细胞,得到携带基因的重组杆状病毒。对转染细胞进行和分析,结果显示鞍自赟昆虫细胞中得到成功表达,且重组蛋白主要以包涵体形式存在。重组鞍啄芄挥肟笲绵羊阳性血清发生反应,⒈,利用原核表达系统对基因进行分段表达。利用两对引物以重组供体质粒D0謇┰龀隽蕉文康幕因虰。将虰基因分别克隆到原核表达载体校菇ㄖ刈楸泶镌靥錺和和峁允局刈榈鞍譜和茉诖蟪Ω司械玫酱罅勘泶铮要以包涵体形式存在。表达产物以尿素变性后利用髦云浣斜湫源炕结果表明两段重组蛋白均能与抗嘌蜓粜匝G宸⑸匾煨苑从Γ弑噶己玫目乖浴以原核表达的重组蛋白蚔为免疫原共同免疫/∈螅⑼ü9嬖咏瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与细胞进行融合。以原核表达的两段重组蛋白为主要检测抗原,建立间接觳夥椒ㄉ秆》置诳筕蛋白单克隆抗体脑咏涣鱿赴=ǖ谝淮紊选到的阳性克隆以真核表达的重组鞍孜<觳饪乖ü浣覧方法进一步筛选,最终获得昴芪榷ǚ置诳笲鞍譓的杂交瘤细胞株,分别命名为韵录虺莆和结果表明闙胫刈榈鞍蚔.⑸匾煨苑从Γ肟赵靥灞泶锊锒哉詹环⑸从Γ弑噶己玫姆从υ浴间接免疫荧光结果表明,闙隑呈阳性反应,其中与~~、茨城病病毒、中山病病毒、赤羽病病毒、牛轮状病毒、牛呼肠孤病毒均呈阴性反应,与和嗜跹粜苑从Α@煤铣呻姆椒ǘ株所识别的鞍椎目乖砦唤行了鉴定,结果表明,:侗鸬目乖砦晃琈识别的抗原表位本研究制备的闎鞍譓八ǖ目乖砦唬狟型特异性检测方法的建立及鞍坠δ苎芯刻峁┝嘶。訠姆揽鼐哂兄匾R庖濉中国农业科学院硕士学位论文、
关键词:蓝舌病病毒血清型,鞍祝タ寺】固澹乖砦
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目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯