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兰羔兰兰了瑁豪压埂9时帆沙//年独创性痩关于论文使用授权的声明乡\、C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特韙员曜⒑椭滦坏牡胤酵猓畚闹胁话渌艘丫表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。月矿日
\\~傻覆≥让壤岛蜥溯/瑰茹博导∥硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表博导矿硕导盯博导博导醇论文题目长角血蜱两种功能基因的获得及部分生物学特性的研究专业预防兽医学研究方向刘光远培养单位芯克职称单位寄生虫分子生学论文作者张萍与免疫学指导教师兰州兽医研究所硕姓名专业签名导师≈教授华中农业大学预防兽医尚佑军副研究员甘肃农业大学预防兽医学,研究员辩胡永浩硕导口委付宝权会议记录厥论文答辩时盏氐评何启盖博导口阅人公主曾巧英席放殷宏景志忠贝口
摘要采用和扩增技术在已知序列的基础上设计特异性的引物进行扩增,测序拼关键词:长角血蛑,扩增,反应原性,相对定量,功能特性长角血蜱作为一种专性吸血外寄生虫,是许多细菌、病毒、原虫及立克次氏体等病原体的传播媒介之一,影响人类和家畜的健康,严重制约着我国备牧业的发展,引起重大的经济损失。传统的化学药物防控虽然在一定程度上对蜱起到了防控作用,但是蜱耐药性及环境污染等问题的出现使得研究新的生物防控途径成为蜱防控的必然趋势。近年来以免疫学为基础的疫苗防控为人们研制生物抗蜱疫苗提供了新的思路,而这一途径的关键在于蜱功能分子的鉴定。本研究采用末端快速扩增技术对文库中筛选到的未知基冈进行扩增,获得了目的基因的全长序列,随后进行克隆和表达,分析其分布及生物学功能,评估其作为控蜱疫苗候选抗原的可行性,从而为研制抗蜱生物疫苗奠定理论基础。采厢疪际趵┰ü唇邮状位竦昧顺そ茄r缢嵝粤姿崦傅娜ǔば蛄小8没蛉ǔ,含有完整的开放式阅读框嗦个氨基酸,.。生物信息学分析表明,该序列含有鎏腔坏恪⒁桓鲂藕烹暮投喔隽姿峄坏悖送庖匀说前列腺酸性磷酸酶为模板构建了该蛋白的空间三维结构。将该序列提交到菘庵校得了登录号。将重组质粒一/一糜诖蟪Ω司薪写罅勘泶铮ü齏分析该基因显示出很好的反应原性。酶活性分析表明该酶在时水解对硝基苯磷酸二钠的能力最强。.治鼋峁砻鳎焊没栽诔そ茄r绲牟煌⒂锥尉表达,且在半饱血时期表达量明显上调;组织分布表明该基因在部分饱血长角血蜱中肠中的表达丰度明显高于卵巢和唾液腺;⑸浜蜕J咸├。这些结果表明该基因可能与蜱的发育、吸血、血液消化和蜱的天然免疫相关。,其他生理指标不明显。接后得到了的长角血蜱的っ敢种错误表达抑制基因娜ǔば蛄小该基冈含有一个完整的嗦个氨基酸,⒀Х治霰砻鳎眯蛄泻个糖基化位点,没有信号肽和跨膜结构域,是一种膜外蛋白。将该序列提交到菘庵校竦昧说锹己臜=康幕蛄帘泶载体..薪性丝寺”泶铮琖分析表明该基因具有很好的反应原性。治霰砻鳎没栽诔そ茄r绮煌⒂锥沃芯泶铮以诎氡パ=锥伪泶锪可撸在部分饱血蜱中,.。.
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目录文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.蜱功能分子研究的重要性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.蜱功能基因的分布、类型及研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..≡ú┯┬韵喙氐牟呗浴研究的内容和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯