文档介绍：鸭密级:论文编号:
·.一
\.酝,\\\\.铂善裰冷髟一/谚纱/砀韵告,乙/中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目鸭肠炎病毒及基因的鉴定动物病毒分子生物学与分论文作者朱洪伟研究方向子免疫学指导教师孔宪刚培养单位芯克⒅行哈尔滨兽医研究所硕导姓名职称单专业博导口阅教授东北农业大学翁长江研究员预防兽医学于力中科院昆明动物研究张华堂博导一扈荣良军事医学科学院博导■军事兽医研究所委华育平东北林业大学涂长春会议记录厥王永强论文答辩时间地点年跏抟窖芯克醣ǜ嫣位签名师硕导口评人答辩主李庆章基础兽医学席放所博导●贝、/口●
独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了学同明印。
摘要鸭肠炎病毒殖蒲拣逭畈《綢型,是鸭、鹅及天鹅等雁形目水鸟的一种重要病原体,可引起急性、接触性传染的鸭病毒性肠炎貌≡诩已耙吧葜锌稍斐筛咚劳雎始安蛋下降。蜃镈序列的测定工作直到最近瓴怕叫瓿桑浔嗦牖虻娜范ù蠖仅停留在与其他疱疹病毒同源基因的序列分析基础上,对蛋白编码基因的探索有助于我们更好地了解该病毒的生物学特征。为此,本研究开展了和基因及其编码蛋白的鉴定和分析工作。由鐾庀宰雍个的内含子组成,其编码序列可转录鲎B急荆喝ǔさ及末端截断的..的转录本编码—.霭被岬牡鞍字剩浞肿恿看笮鳸转录本长约,包含的肙编码一大小约为肽。序列分析表明编码序列在疱疹病毒科内高度保守,并且含有鲈陴逭畈《炯笆删迥端酶催化亚基序列中保守的蚖颉;个疱疹病毒的氨基酸序列构建的系统发育树表明隺疱疹病毒亚科,病毒属内病毒亲缘关系较近。此外,的转录和表达对放线菌酮挽⒁宜均敏感,说明在粗乒讨型砥诒泶铩结果显示,《玖W又屑觳獠坏降鞍椎拇嬖凇<浣用疫荧光结果显示,在感染早期定位在赴南赴手校痹蜃T进入细胞核,而在无其他病毒蛋白参与下,则滞留在细胞质内。耐吹鞍妆嗦氩《舅拗鞴乇盏鞍注鬑,可非特异性的降解宿主及病毒。被嵝蛄芯哂泻怂崦讣易宓鞍滋卣鳎夷D獾占浣峁挂酆厦傅幕钚郧蚝芎玫牡稀4送猓赨被嵝蛄泄菇ǖ南低发育树分析发现隡诓《厩自倒叵到辖为进一步分析编码蛋白特性,将寺≈帘泶镌靥錺校吮泶锪丝扇性全长融合蛋白甎⒅票噶丝筓目寡G濉K婧蟮奶逋釼活性检测发现,融合蛋白具有钚浴细胞内瞬时表达的可致共转染的报告基因泶锪拷档停证实了细胞内表达的蛋白的钚浴4送猓毙蛐苑治龇⑾諹虻谋泶锒訡敏感,而对幻舾校得鱑窃缙诒泶锘颉结果显示,腥镜南赴诳杉觳獾経鞍椎拇嬖冢珼病毒粒子中也含有蛋白。在腥镜腃细胞内,定位在细胞质的核周区域,感染早期呈颗粒性聚集分布。在转染的细胞中,瞬时表达的主要位于细胞质的核周区域,细胞核中也有少量分布。最后,蛋白上的保守性氨基酸残基的单点突变可导致蛋白的性的降低或丧失。综合突变分析及同源蛋白预测的结果推测,和可能是蛋白上的一个配体结合位点。综上所述,本研究鉴定了腢蚅基因和/或其编码的蛋白,为明确《在疱疹病毒科的分类地位以及阐明这龅鞍自贒感染中的作用提供了实验数据。约为亩瓸搜索显示,与蚑
关键词鸭肠炎病毒:;;末端酶;病毒宿主关闭蛋白:表达时序性;亚细胞定位
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目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.鸭病毒性肠炎概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..∫蜓Ъ傲餍胁⊙.±聿”《拘猿ρ椎姆乐啤鸭肠炎病毒生物学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⑸胂赴某⒔峁贡浠肿由镅а芯拷埂蜃樾蛄械牟舛ā蜃榻峁埂逭畈《镜母粗啤.《疚讲⒔.《净虮泶铩.《綝复制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..《疽驴前啊.《咀邮头拧幕蚪峁辜氨嗦氲鞍坠δ堋.
病毒宿主关闭蛋白的功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...逭畈《居盏妓拗鞴乇盏囊话闾卣鳌淖饔没怼纳镅Чδ堋研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..第二章鸭肠炎病毒基因及其编码蛋白的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.《⑾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.《镜拇炕躌的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。法扩增基因编码序列⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。基因剪切位点的确定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.地高辛标记的探针的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.