文档介绍：谨以此论文献给我的导师和家人谭玉龙
’玻汉ⅲ矽机街矾胪\≯广二喇芜:.群√【、.乙互旎脚灰阴0被咸烟擒彰讣捌淇蔷厶悄擅撞牧固定化酶抗细菌生物被膜作用研究『拶学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:
导师签字:学位论文作者签名:谭参在学位论文作者签名:谊;,龙签字日期:如,,年∥月侈日独创声学位论文版权使用授权书明如邀查甚丝置蔓缱别直堕笪:奎拦互窒蚱渌逃沟难换蛑な槭褂霉签字日期:舢厂/年侣淙本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。笕本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得签字日期:/年
灰阴0被咸烟擒彰讣捌淇蔷厶悄擅撞牧瞎潭ɑ抗细菌生物被膜作用研究摘要时,其对生物被膜形成的抑制率达到%以上。同样,在细菌生物被膜是指由细菌和由细菌自身所分泌的包裹着细菌的胞外基质所组成的结构性细菌群落,其中胞外多糖魑;实闹饕3煞种徊斡肓细菌的初始粘附,成熟的生物被膜结构形成等。研究表明,金黄色葡萄球和表皮葡萄球菌生物被膜中重要多糖成分是,阴0被咸前贰J笛槭蚁绕谘芯中发现的,阴0被咸烟擒彰窷梢宰ㄒ唤到釨—.阴0基葡糖胺。本文系统研究了对革兰氏阳性茵饕J瞧咸亚蚓生物被膜形成的作用,并利用羧甲基壳聚糖。,擅撞牧对酶进行固定化,研究了固定化酶的相关性质。本实验首先利用多种体外生物被膜模型,包括孔静态模型、态模型,并以临床常用氯乙烯导管、氯乙烯膜片和导尿管为材料构建了相关的模型,评价了对细菌生物被膜形成的作用。实验表明,,‘也能显著抑制金黄色葡萄球菌生物被膜的形成。在临床使用的氯乙烯膜片与导尿管等模型中,对表皮葡萄球菌生物被膜形成的抑制率分别达到%和%。实验进一步表明对于已形成的细菌生物被膜亦具有明显的清除作用,当终浓度达到痬保涠跃蔡P蜕锉荒さ那宄蚀锏ヒ上,而对于动态模型下的生物被膜清除率则达%以上。对形成于医用材料氯乙烯膜片与导尿管上的生物被膜清除效果分别为%和%。细菌生物被膜是细菌产生抗药性的物理屏障,为了确定是否能增强生物被膜内细菌的抗生素敏感性,测定了氨苄青霉素单独以及其与联合条件下,不同菌株的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度琈白畹蜕锉膜清除浓度动琈。结果表明,乙酰氨基葡萄糖苷酶及其壳聚糖纳米材料固定化酶抗细菌生物被膜作用研究痬’
关键词:皿蓿阴0被咸烟擒彰窷锉荒ぃ还潭ɑ嚎蔷厶牵荒株受试菌株形成生物被膜后对氨苄青霉素的抵抗能力有不同程度的提高倍琋荒芨谋涓∮,本实验成功建立了金黄色葡萄球菌小鼠烫伤生物被膜模型并将作用于感染处,结果显示可有效抑制并清除感染处的生物被膜。与抗生素联用可明显提高抗生素的作用效果。由于溶液酶存在稳定性差、不能反复利用等缺陷,本实验以羧甲基壳聚糖纳米粒为载体,研究了固定化酶的活力并对影响酶活力的因素包括温度、储存稳定性等进行了检测。实验结果表明,固定化提高了酶的稳定性,同时固定化酶重复操作魏螅杂サ幕钚裕砻鞴潭ɑ甘视诿傅幕厥沼敕锤蠢谩在细菌生物被膜形成方面,固定化酶对生物被膜的抑制效果和清除效果均优于溶液酶。实验过程中发现,固定化酶的材料羧甲基壳聚糖本身也具有抗生物被膜效果,因此本文深入研究了羧甲基壳聚糖对生物被膜的影响。在孔板模型和动态模型下,可以有效抑制革兰氏阳性和阴性细菌生物被膜的形成。在初始黏附阶段对铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的抑制率均大于%,而其对生物被膜菌细胞与细胞之间聚集能力的抑制率分别为%和%。矿作用机制方面并不能影响细菌生长,而是导致细菌絮凝,其对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的絮凝指数分别为%和%。进一步分析发现,对细菌絮凝作用是由于带有的正电荷中和了细菌表面的负电荷,另外推测本身的吸附架桥作用也可促进絮凝。综上所述,在不同模型中均具有良好的生物被膜形成抑制作用和清除作用;固定化提高了酶的稳定性增强了酶的活力,有利于酶的重复利用;羧甲基壳聚糖自身亦具有良好的抗细菌生物被膜形成作用。以上工作对新型抗生物被膜药物的研究、开发与实际应用具有重要意义。米粒乙酰氨基葡萄糖苷酶及其壳聚糖