文档介绍：——王东升谨以此论文献给恩师池振明教授、我的家人和所有关爱并默默支持我的朋友们
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洲晁嵝缘鞍酌富蚝汀危,基因敲除对酶的生产和海藻糖积累的影响扣囊复膜酵母答辩委学位
签字日期:矽苣甏踉挛迕瓿г铝ο签字日期:⒀?梢越宦畚牡娜ú炕虿糠帜谌荼嗳胗泄厥菘饨屑焖鳎梢本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,并同意以下⒀S腥ūA舨⑾蚬矣泄夭棵呕蚧顾徒宦畚牡母从〖痛排蹋市采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊馀贪电子杂志社糜诔霭婧捅嗳隒吨泄J蹲试醋芸狻罚授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ确的说明并表示谢意。事项:论文被查阅和借阅。学位论文作者签名:导师签字:
生什么样的影响。首先利用编码潮霉素姿嶙R泼傅幕虼季闍扣囊复膜酵母晁嵝缘鞍酌富蚝蚆/蚯贸酶的生产和海藻糖积累的影响摘要扣囊复膜酵母菌是子囊菌属的一个种,它可以利用淀粉积累海藻糖,并能分泌大量的淀粉酶、酸性蛋白酶、咸擒彰负推它酶。所以扣囊复膜酵母在发酵行业、医药行业和生物能源工业有着巨大的潜在本实验室最近几年对高产海藻糖的扣囊复膜酵母杲辛舜罅垦芯浚获得许多重要结果。由于酸性蛋白酶在酸性条件下可以分解其它酶,对其它酶的产生会造成不利的影响。所以本研究试图通过基因敲除法敲掉扣囊复膜酵母晁嵝缘鞍酌富颍缓笱芯扛没虻那贸云渌傅牟臀榷ɑ岵茉诤谐泵顾氐呐嘌猩ぃ⑶以谂D平板上不能形成水解透明圈,而原始菌株谂D唐桨迳夏苄纬纱蠖逦水解透明圈。%,说明了酸性蛋白酶的缺失会大大提高敲除菌株淀粉酶的稳定性。敲除菌株赴暮T逄腔哿看锏搅讼赴芍氐%/,而原始菌株挥/,说明了酸性蛋白酶的缺失还会大大提高敲除菌株转化淀粉合成海藻糖的能力。目前如何有效地从酵母细胞中提取海藻糖是一个问题,一般是用乙酸提取,但是三氯乙酸是蛋白质变性剂,并且具有很强的腐蚀作用。有研究表明当高热敏渗透突变株在℃的低渗透压水中孵育时,细胞内含物能被释放出来。所以本研究利用上述应用价值,但是人们对它的生理遗传系统了解得还很少。腛替换甑乃嵝缘鞍酌富因的;
≡谡袅笏芯婀勾砗螅赴寤染嗤跫理的暌4螅得饔捎谙赴ㄍ感苑⑸浠贾孪赴谡袅笏蟹⑸膨胀。在摇瓶和籰发酵罐中培养,,最后获得了高纯度的海藻糖晶体。从而建立了一种从酵母菌细胞中提取海藻糖的简单、经济、安全和有效的新工艺。在微生物中葡萄糖阻遏是一种非常普遍的现象,在葡萄糖存在情况,许多酶的合成和基因表达都会受到抑制。参与葡萄糖阻遏作用的主要两种蛋白是和,是一种蛋白激酶,在培养基中有葡萄糖存在情况下可以使发生磷酸化反应,磷酸化的可以使有关的基因表达受到阻遏,所以如果把编码的基因敲除,酵母细胞不管是否生长在葡萄糖培养基中有关基因表达都不会受到阻遏。本研究首先用简并引物ê头聪騊法从扣囊复膜酵母菌株的基因组锌寺〕隽薓基因。克隆的基因牡锹己牛篐全长,编码霭被岬牡白质,该蛋白质的氨基酸序列与其它真菌的浅@嗨疲懈叨缺J氐牧礁锌指结构,蛋白还有一个短的保守模序,可能在葡萄糖阻遏中有重要作用。基因的峁诤谐泵顾氐腨平板上获得了敲除菌株在含有蜒跻籇葡萄糖的桨迳仙ぃ季闍都不能,说明敲除菌株的葡萄糖阻遏得到了解除。与菌株啾龋贸闍淀粉酶、、葡糖淀粉酶、酸性蛋白酶和咸擒彰富虻谋泶锪恳灿屑ù筇岣摺U饩椭っ鳎勰腋茨そ湍钢械确实能阻遏某些基因的转录,它对一些基因的表达和一些胞外酶的生产起调控作用。综上所述,本论文研究了扣囊复膜酵母嵝缘鞍酌富蚝蚆虮磺中国海洋大学博士学位论文Ⅱ
除后对多种酶生产及海藻糖积累的影响,这对于了解扣囊复膜酵母菌生理和遗传,开发和利用扣囊复膜酵母具有积极意义。关键词:扣囊复膜酵母;基因敲除;