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一、耗材质检的原则
耗材的质检通常是在新一批的耗材到实验室后统一做一次或者定期
(半年或1年)做,因而质检就包含了验货和质检2个局部。由于耗
材的质检没有一个统一的规范,普通由各实验室自行制定,可简可繁,
这里提出一些办法供大家参考。
:外包装应完好无损无污,标识分明,检查品名、品牌,
货号,规格、消费日期,有效期、保管条件等信息。
:内包装物品应与外包装标识分歧,检查能否有破损,走
漏,内容物能否齐全,能否有相应的运用阐明书等。
:检测试剂耗材能否与其性能分歧,比方吸头的精确性和气
密性等
:检测试剂耗材能否被常规检测项目的待检物污染,这种
污染可能是物品消费环节,也可能是运输或实验室的保管过程中被污
染。
:检测试剂耗材中能否存在PCR的抑止物,比方核酸酶。
二、耗材质检的条件
:需求准备弱阳性质控,包括规范物质、第三方质控或弱
阳性样品用于停止性能质控和抑止物质控。
:需求准备肯定阴性的样品或空白对照,用于停止污染物的
质控。
三、常见耗材的质检
耗材的质检应分离实践工作中可能用到的场景,并非越苛刻越好,需
求每个实验室分离本身状况来设计和调整文中提到的参数。
离心管
(1)渗漏密闭性:将n个离心管参加半量墨汁,盖好盖子后放入水中,
浸泡30min,没有墨汁渗出为合格。
(2)离心密闭性:将n个离心管参加半量纯水,放入离心机,10000rpm,
30min,管盖未崩开未漏液为合格。
(3)热密闭性:将n个离心管参加半量纯水,盖好盖子称重后放入金
属浴中,65℃或90℃(巴氏消毒),30min,再停止称重,离心管未
变形,管盖未崩开未漏液,前后重量未变化为合格。。
(4)冷密闭性:将n个离心管参加半量纯水,放入-20℃冰箱,24h,
离心管未变形,管盖未崩开未漏液为合格。
(5)污染物质检:将n个离心管分别参加半量阴性纯水,盖好盖子涡
旋1min后静置5min,汲取纯水作为模板停止扩增,qPCR无扩增为
合格。
(6)抑止物质检:将n个离心管分别参加弱阳性质控物,室温静置5min,
然后停止提取;RNA核酸,DNA核酸,室温静置5min,作为模板停止扩
增,qPCR扩增未被抑止为合格。
PCR管
(1)渗漏密闭性:将n个PCR管参加半量墨汁,盖好盖子后放入水中,
浸泡30min,没有墨汁渗出为合格。
(2)离心密闭性:将n个PCR管参加半量纯水,放入离心机,1000rpm,
30min,管盖未崩开未漏液为合格。
(3)热密闭性:将n个PCR管参加半量纯水,盖好盖子称重后放入PCR
仪,设置一个常用的PCR程序,程序运转终了后,再停止称重,PCR
管未变形,管盖未崩开未漏液,前后重量未变化为合格。
(4)冷密闭性:将n个PCR管参加半量纯水,放入-20℃冰箱,24h,
离心管未变形,管盖未崩开未漏液为合格。
(5)污染物质检:将n个PCR管参加半量阴性纯水,盖好盖子涡旋1min
后静置5min,作为模板停止扩增,qPCR无扩增为合格。
(6)抑止物质检:将n个PCR管分别参加弱阳性质控物,室温静置5min,
然后停止提取;RNA核酸,DNA核酸,室温静置5min,作为模板停止扩
增,qPCR扩增未被抑止为合格。
(7)空白荧光通透性:关于qPCR,需求调查PCR管能否有非特异性荧光
信号,将n个空PCR管,盖好盖子后放入PCR仪,设置一个常用的PCR
程序,程序运转终了后,qPCR无扩增为合格。
(8)阳性荧光通透性:关于qPCR,还需求调查PCR管能否会抑止荧光的
通透性,将n个含弱阳性样品和扩增试剂的PCR管,与确认无荧光干
扰的PCR管,盖好盖子后放入PCR仪一同扩增,设置一个常用的PCR
程序,程序运转终了后,qPCR扩增未被抑止为合格。
吸头
(1)精确性:将n个吸头分别汲取定量的纯水称重,重量与体积的关
系依照1g/mL换算。
(2)气密性:取n个吸头,汲取最大量程的含有1%甘油的墨水,察
看有色液体不呈现在滤塞之上,液面相同为合格。
(3)防气溶胶性能:取n个吸头,汲取阳性核酸,重复吹吸10次,换
另一个新吸头在阴性纯水中重复吹吸10次,取阴性纯水作为模板停
止扩增,qPCR无扩增为合格。
(4)污染物质检:取n个吸头,汲取阴性纯水重复吹吸10次,取阴性
纯水作为模板停止扩增,qPCR无扩增为合格。
(5)抑止物质检:取n个吸头,汲取弱阳性质控物重复吹吸10次,然
后停止提取;汲取RNA核酸和DNA核酸重复吹吸10次,作为模板停止
扩增,qPCR扩增未被抑止为合格。
采血管、采样管、采样拭子和一次性吸管
(1)污染物质检:将n个耗材参加一定量阴性纯水,盖好盖子涡旋1min
后静置30min,汲取纯水作为模板停止扩增,qPCR无扩增为合格。
(2)抑止物质检:将n个耗材分别参加弱阳性质控物,室温静置30min,
然后汲取质控物停止提取;作为模板停止扩增,qPCR扩增未被抑止为
合格。
无核酸酶水、PBS等缓冲液
(1)PH值:丈量各缓冲液的PH值。
(2)污染物质检:汲取缓冲液作为模板停止扩增,qPCR无扩增为合格。
(3)抑止物质检:将缓冲液分别与RNA核酸和DNA核酸混合,然后汲
取混合液作为模板停止扩增,qPCR扩增未被抑止为合格。
移液器和离心管架及离心机的内表面
(1)外表核酸污染:用沾湿的拭子擦拭上述物品的表面面,然后浸泡
到纯水中10min,汲取纯水作为模板停止扩增,qPCR无扩增为合格。
(2)移液器内腔核酸污染:关于常用的移液器的内部,可运用无滤芯的
吸头在阴性纯水中吹吸10次后,汲取纯水作为模板停止扩增,qPCR
无扩增为合格。
(3)细菌污染:用沾湿的无菌拭子擦拭上述物品的表面面,划琼脂平
板,每个平板的菌落数不应超越一定数量(我也不肯定几适宜,由于
不请求无菌操作一定会有细菌,但是也不应该太多)。