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选修一生物技术实践知识点总结
专题1课题3制作泡菜
―、基础知识
1、制作泡菜的原理:乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸。
2、测定亚硝酸盐含量的原理:
在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将经过反应显色后的待测样品与标准液比色,大致估算出样品中的亚硝酸盐含量。
3、亚硝酸盐:白色粉末,易溶于水。
特定的条件下会转化成致癌物质亚硝胺。
二、实验设计
流程图
加盐盐水冷却卜|剋菜蘇
测亚硝酸盐含园
泡菜盐水按清水和盐为4:1质量比配制煮沸冷却备用。煮沸为了杀灭盐水中的杂
菌,冷却后使用为了保证乳酸菌的生命活动不受影响。
倒入配制好的盐水,使盐水浸没全部菜料。
盖上泡菜坛盖子,坛子边沿加水,以保证无氧坯境
发酵时间受到温度影响。
三、操作提示
1、泡菜坛的选择:火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好,否则容易引起蔬菜腐烂。
2、腌制的条件:注意腌制的时间、温度和食盐的用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短易造成细菌增殖,亚硝酸盐含量增加。
3、测定亚硝酸盐含量的操作。
四、教材答案
1、含有抗生素的牛奶能不能发酵成酸奶?为什么?
不能。因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。
2、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?
形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。
3•为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?
放置过久时发生变质(发黄、腐烂),蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。
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?不封闭有什么结果?
保证泡菜坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。
如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。
专题2课题1微生物的实验室培养
一、基础知识
1、培养基:人们按照微牛物对营养物质的不同需求,配制岀供其生长繁殖的营养基质。
⑴培养基按照物理性质可分为液体培养基(主要用于工业生产菌种的繁殖)、半固体培养基(观察细菌运动、鉴别菌种)和固体培养基(主要用于菌种的分离、计数、鉴别)。在液体培养基中力口入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。菌落是菌种鉴定的重要依据。
(2)按照培养基的用途,可将培养基分为选择培养基和鉴别培养基。
⑶培养基的化学成分包括:水、无机盐、碳源、氮源、(生长因子)等。
无机碳源不能为微生物提供能量;
含碳有机物是异养型微生物的碳源和能源;
无机氮源nh3既是硝化细菌的氮源,也是其能源;n2是固氮菌(如根瘤菌)的氮源。
CO2是硝化细菌的碳源,能源来自其化能合成作用产生的有机物。
2、无菌技术:获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,要注意以下几个方面:
对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。
将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。
为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
3、消毒与灭菌的区别
⑴消毒:指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒常用煮沸消毒法、巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)、化学药剂消毒、紫外线消毒。
⑵灭菌:则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
⑶灭菌方法:
接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;
玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法(160-170°C),所用器械是干热灭菌箱;
培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法(压力100KPa温度121°C),所用器械是高压蒸汽灭菌锅。
(4)消毒与灭菌的共同点:
都需借助理化性质营造微生物难以生存的不良环境;
其作用原理都是通过使蛋白质变性来抑制微生物的生命活动或杀死微生物。
4、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基
⑴方法步骤(5步曲)):计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
称量:牛肉膏黏稠,用称量纸称取;牛肉膏、蛋白胨易吸潮,称取要快、加盖。
溶化:牛肉膏、称量纸、少量水加热溶解一取纸一蛋白胨、NaCl—琼脂一补水定容一调pH。
思考:溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?答:可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中,减少误差为什么溶化时要不断用玻璃棒搅拌?
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答:防止琼脂糊底而导致烧杯破裂
倒平板:待培养基冷却到50°C左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。
【教材答案】
无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?答:还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2•培养基灭菌后,需要冷却到50C左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?
答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。
为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。
在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。
5、纯化大肠杆菌
⑴微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(菌落)。
⑶稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。
⑷用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使聚集在一起的微生物分散成单个细胞•。
⑸平板划线法操作步骤:详见教材
⑹平板划线操作的讨论:为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。
⑺稀释涂布平板法中涂布平板操作的步骤:
将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
取少量()菌液,滴加到固体培养基表面。
将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8〜10s。
用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
(8)平板划线法与稀释涂布平板法各自的优缺点是什么?
共同点:都能使细菌纯化;
不同点:平板划线法不易分离出单个菌落,不能计数,;稀释涂布平板法能使单菌落分离,便于计数。
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优缺点:稀释涂布平板法统计样品中的数目往往比实际数目低,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板观察到的只是一个菌落。
6、菌种培养
将接种后的培养基和一个未接种的培养基(起对照作用,检测培养基是否合格)一起放入37°C恒温箱中培养,分别观察并记录结果。
7、菌种的保存
⑴对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。(于4C的冰箱中保藏。缺点:这种方法保存的时间不长,菌种容易被污染或产生变异。)
⑵对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。(菌液与甘油充分混匀后放在-20C的冷冻箱中保存。)
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、课题背景
尿素---是一种重要的农业氮肥,但尿素不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶。
二、筛选菌株
(1)实验室中微生物的筛选应用的原理
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
(2)选择培养基在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养
基,称作选择培养基。
加入青霉素的培养基:细菌不生长,酵母菌、霉菌等真菌能生长;
不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物(如硝化细菌):
加入高浓度的食盐的培养基:可选择培养金黄色葡萄球菌等。
加入%为唯一氮源的培养基:可选择固氮菌。加入尿素为唯一氮源的培养基:可选择分解尿素的菌。加入纤维素为唯一碳源的培养基:可选择分解纤维素的菌
三、统计菌落数目
(1)测定微牛物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。
(2)显微镜直接计数法缺点:不能区分死菌与活菌.
【例】每一个大方格边长为1mm,则每一大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,,。下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算:设五个中方格中总菌数为A,菌液稀释倍数为B,那么,一个大方格中的总菌数是多少?1ml菌液中的总菌数?(1ml=1cm3=1000mm3)
【答案】5A5ABX104
活菌计数法:统计的都是活菌的数目
原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
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公式:每mL样品中的菌株数=(CFV)XM;C代表计数的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液体积,M代表稀释倍数。
为了保证结果准确,一个稀释度下一般设置3〜5个平板(至少3个),选择菌落数在30〜300的平板进行计数,取平均值为这个稀释度下的菌落数。
缺点:统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
总结:两个“3”,“3”个稀释度(保证获得30-300个菌落数),每个稀释度下涂“3”个平板(取平均值,保证计算结果可靠)
四、设置对照
设置对照的主要目的是:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响•提高实验结果的可信度。
五、实验设计
土壤取样:从富含有机物、潮湿、pH~7的土壤中取样。铲去表层土3cd左右,在距地表约3〜8cm(为什么?因为此深度的土壤酸碱度接近中性•适于细菌繁殖)的土壤戻取样。
制备培养基:分别配置牛肉膏蛋白胨培养基和以尿素为唯一氮源的选择培养基。(牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用)
样品的稀释和涂布:在实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板。
测定土壤中细菌的数量,一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养;
测定放线菌的数量,一般选用103、104、105倍的稀释液进行平板培养;
测定真菌的数量,一般选用址—倍的稀释液进行平板培养;
思考:为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?答:因为土壤中不同微生物的数量不同,其中细菌最多,真菌最少。
微生物的培养:不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。
细菌30~37°C1~2天
放线菌25~28C5~7天
霉菌25~28C3~4天
计数:每隔24小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
六、操作提示
⑴取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。
应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,塞好棉塞。
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⑶在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁讲行。
⑷实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。
⑸为了提高效率,在操作时更加有条不紊,应当事先规划时间。
七、菌种鉴定
在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性增强,PH升高。因此,我们可以通过检测培养基pH变化来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变红,说明该细菌能够分解尿素。
课题3分解纤维素的微生物的分离
一、基础知识
1纤维素酶
(1)组成:纤维素酶是一种复合酶,包括三种组分,即C]酶、cX酶和葡萄糖苷酶。
纤维二糖
八」门Ziihi”葡萄糖
筛选方法:刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。
筛选原理:
刚果红可以与纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样我们可以通过是否产牛透明圈来筛选纤维素分解菌。
二、实验设计
流程图:
土壤取样-选择培养(此步是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)-梯度稀释-将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上-挑选产生透明圈的菌落
土壤取样:选择富含纤维素的环境。
选择培养:选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度。
刚果红染色法:
分为两种:一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应:另一种是在倒平板时就加入刚果红。
三、课题延伸
对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后,只是分离纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验,纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。
【教材答案】
为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌?
由于生物与环境的相互依存关系,在富含纤维素的环境中,纤维素分解菌的含量相对提高,因
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此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。
将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深?
将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。
3•为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物?
在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。
4•本实验流程与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的实验流程有哪些异同?
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验:将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上直接分离得到菌落;
分解纤维素的微生物的分离的实验:通过选择培养,使纤维素分解菌得到繁殖后,再将菌液涂布在选择培养基上。其他基本一致。
专题5课题1DNA的粗提取与鉴定
一、基础知识
(一)DNA的溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;
;。
选择适当的盐浓度能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的。
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
(二)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
1•蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响
2•大多数蛋白质不能忍受60〜80°C的高温,而DNA在80°C以上才会变性
3•洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。_
(三)DNA的鉴定XH_-
在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色。
二、实验设计
(一)实验材料的选取
不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
1、本实验用鸡血细胞做实验材料有哪些原因?
答:一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长。
鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了减少DNA的损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液。
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液
2、若选用鸡血和洋葱作实验材料,则怎样获取含DNA的滤液?
在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅拌,过滤后收集滤液;切碎洋葱,加入一定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,过滤后收集滤液。
3、为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出DNA。
4、在以上实验中,加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?用什么过滤研磨液?答:;洗涤剂瓦解细胞膜;食盐溶解DNA物质;选用尼龙布进行过滤。
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5、在处理植物组织时需要进行研磨,其目的是什么?研磨不充分产生什么结果?
答:破碎细胞壁,使核物质容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会使DNA的提取量减少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。
具体做法°10mL鸡血+20mL蒸馏水一同方向搅拌一3层尼龙布过滤一滤液
(三)去除滤液中的杂质
6、为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质,需要进一步提纯DNA。
总结:方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同:方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。
7、方案二与方案三的原理有什么不同?
答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开:方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分离。
(四)析出与鉴定
8、在滤液中仍然含有一些杂质,怎样除去这些杂质呢?得到的DNA呈何颜色?
答:滤液与等体积的冷却酒精混合均匀,静置2〜3分钟,析出的白色丝状物就是DNA。
9、怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢?
答:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
具体做法:试管2支,编号甲乙一各加等量5mLNaCl溶液一甲中放入少量白色丝状物,使之溶解一各加4mL二苯胺,混合均匀一沸水浴5min一观察颜色变化
实验操作
映验材料的制备(
破碎细胞,获取
含1>亦的濺液
③)去除滤液中的”杂质
鸡血
加抗擬血剂离心一4—舍弃血浆
jam胞液
加蒸懈水一J血细胞破裂纱布±1滤—J—滤渣(细胞膜等}含DNA购滤液
2mol/LNaCl—4溶解
盘少布过滤一J除去不溶杂质
含DNA的滤液
白色丝?U黏稠物
多层纱布过滤」I-除去溶液中的杂质
含DMA的黏稠物
2niul/L1溶解DNA黏■■稠物
纱布过滤~J-滤漬(蛋口质等}
f含DNA的滤丫夜
“冷却的95%洒精一I落解杂质(蛋口质等)
④DNA的析出w白色丝状物庾
玻璃榨搅拌一J*滤纸吸去水分
DNA鉴定二苯胺,沸水浴,呈现蓝色
三、操作提示
在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固;鸡血静置或离心以提高细胞悬液浓度;
使用塑料烧杯;使用尼龙布过滤:玻棒沿同一方向搅拌;
加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。
加入酒精和用玻棒搅拌,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
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二苯胺试剂要现用现配,否则会影响鉴定的效果。。
四、课题延伸
实验室提取好浓度DNA时,通常使用十六烷基三甲基溴化氨(CTAB)、十二烷基硫酸钠(SDS)或吐温等化学试剂。
原理总结:通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA:再利用酒精讲一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的:最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。
专题6课题1植物芳香油的提取
一、基础知识
天然香料的主要来源:植物、动物不同植物的根、茎、叶、花、果实、种子都可以提取芳香油。芳香油的提取方法:蒸馏、压榨、萃取等。
芳香油的性质:挥发性强,成分复杂,以萜类化合物及其衍生物为主。
水蒸气蒸馏法:
原理:水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物,冷却后水油分层。方法:水虫蒸馏:原料放在沸水中加热蒸馏。
水上蒸馏:原料隔放在沸水上加热蒸馏。
水汽蒸馏:利用外来高温水蒸气加热蒸馏。
不足:有些原料不适宜于水中蒸馏,如柑橘、柠檬等易焦糊,有效成分容易水解。通常用压
榨法(通过机械压缩力将液相物从液固两相混合物中分离出来的一种简单操作)
萃取法:
原理:芳香油易溶于有机溶剂,溶剂挥发后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。方法:原料浸泡在溶剂中一得到浸泡液一有机溶剂挥发一芳香油。
不足:有机溶剂中的杂质影响芳香油的品质
蒸馏装置可分为左、中、右三部分,其中左边的部分通过加热进行蒸馏,中部将蒸馏物冷凝,右边的部分用来接收。
从左到右的顺序。拆卸仪器的顺序与安装时相反。具体安装顺
1、安装仪器一般都按照自下而上、
序和方法如下。
L温區计
2、连接冷凝管,注意保证上端出水口向上,通过橡皮管与水池相连;下端进水口向下,通过橡皮管与水龙头相连。
3、将温度计固定在蒸馏头上,使
温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同一水平线上。
4、蒸馏装置安装完毕后,可以在
蒸馏瓶中加几粒沸石,防止液体过度沸腾。
5、蒸馏完毕,应先撤出热源,然
后停止通水,最后拆卸蒸馏装
置,拆卸的顺序与安装时相反。
二、实验设计
1•玫瑰精油的提取
•:促使油水混合物(乳浊液)中油和水的分离。无水硫酸钠:吸收油层中的水分。
实验步骤:①釆集玫瑰花:采集盛花期(5月中上旬)的玫瑰花,清水清洗沥干。
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装入蒸馏原料:称取50g玫瑰花放入蒸馏瓶,添加200mL蒸馏水。
安装蒸馏装置:按照从左向右、自下到上次序安装水蒸气蒸馏装置。
加热蒸馏:控制蒸馏时间和速度(1〜2滴/秒),获得乳白色乳浊液:拆卸装置。
分离油层:向乳浊液加入NaCl溶液后,禾U用分液漏斗分离出上面的油层。
除去水分:向油层中加入无水硫酸钠,24h后过滤,得到玫瑰油。
橘皮精油的提取
橘皮精油的主要成分:柠檬烯,主要分布在橘皮中。
石灰水:防止压榨时滑脱,提高出油率,降低压榨液黏稠度,过滤不堵塞筛眼。
小苏打、硫酸钠:促进油和水的分离(%和5%)。
实验步骤:①橘皮的处理:将新鲜橘皮用清水清洗沥干。
石灰水浸泡:用7〜8%石灰水浸泡橘皮24h。
清水漂洗:浸泡好的橘皮用流水彻底漂洗干净,沥干。
粉碎和压榨:将橘皮粉碎,加入小苏打和硫酸钠后,用压榨机压榨得到压榨液。
过滤压榨液:用布袋过滤,滤液再高速离心处理,分离出上层橘皮油。
静置处理:将橘皮油在5〜10°C冰箱中静置5〜7d,分离出上层澄清橘皮油。
再次过滤:将下层橘皮油用滤纸过滤,滤液与上层橘皮油合并,得到橘皮精油。分析:静置处理目的:除去果蜡和水分。
三、操作提示
注意:蒸馏时间不能过短,温度不能过高。
专题6课题2胡萝卜素的提取
一、基础知识
1、胡萝卜素性质:
橘黄色结晶,化学性质比较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。
2、胡萝卜素分类:
依据碳碳双键的数目划分为a、B、Y三类,其中最主要的组成成分为B-胡萝卜素。
3、胡萝卜素作用:
①治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病:②食品色素:③使癌变细胞恢复成正常细胞。
4、提取B—胡萝卜素的方法:
①从植物中提取②从大面积养殖的岩藻中获得③利用微生物的发酵牛产
二、实验设计
(一)萃取剂的选择
1、有机溶剂分为水溶性有机溶剂和水不溶性有机溶剂两种。水溶性有机溶剂包扌舌:乙醇、丙酮:水不溶性有机溶剂包括:石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳等。
2、萃取胡萝卜素的有机溶剂选择:
具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶。
(二)影响萃取的因素
主要因素:萃取剂的性质和使用量
次要因素:原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等
一般来说,原料颗粒小,萃取温度高,时间长,需要提取的物质就能够充分溶解,萃取效果就好。
萃取前,要将胡萝卜进行粉碎和干燥