文档介绍：维普资讯
/
中煤彳卜生物学受控制杂志年第卷第期
¨
/Ⅲ新疆出血热北疆株单克隆抗体
杂交瘤细胞株的建立
新疆堆吾尔自治区卫生防疫站乌鲁木齐, 白旭华张峰冯崇慧指导
, ——、——一, /
.
、弓
摘要作者应用新疆出血热病毒北疆株’—株鼠脑免疫/小鼠,取脾细胞与
/骨髓瘤细胞融合,共获得株分泌抗北疆株单克隆抗体杂交瘤细胞系。梭型
分析表明符合杂交瘤细胞的标准。用间接免疫荧光法及间接酶联免疫吸附试验检测表明,
的腹水具有报高滴度,其中株可达×/≥.。免疫球蛋白亚型鉴定均属
,其中株为,株为。对的初步应用表明,在反向被动血凝抑制试验
中,分别采用南、北疆致敏血球检
关键词单克隆抗体新疆出血热
新疆出血热是一种以发热、出血离成蜱中分离,在乳鼠脑内传至代,发病曲型,已
为主要临床症状的急性传染病,病死率高达鉴定确为,首次免疫取发病乳鼠脑只研
~ 。本病广泛分布于南疆叶尔恙河中、磨, 脑悬液加等量福氏完全佐剂,.背部皮
下多注射周龄纯系/ 鼠,周后加
下游和塔里木河两岸。:,近几年来国内青
强免疫捷,周后脑悬液尾静脉注射,再次加
海、云南、东北“、四和海南、内蒙等
强免疫,免疫后第天取脾用于融合。免疫鼠血清抗
地都证实有抗体存在。年我们曾建立了体用间接酶联免疫吸附试验和间接免疫荧
株抗南疆株单克隆抗体杂交瘤细胞光试驻检测,教价分别为和:
株。年我们首次在新疆北疆准噶尔盆。
地边缘的阜北农场发现并证实了北疆、器材和试剂:培养板,
疫源地的存在。,并从该地区捕获的亚洲璃.../ 鼠购自华西医科大学
/细胞年从中国预防医学科学院病毒学
眼蜱中分离到株病毒。为进一步研究
研究所肝炎室弓『进,本室保存
南、北疆毒株间的差异,对国内各毒株
...;一日本制药株式会社.
;新小牛血清五一农场年春由奉室分
的特异、快速、;各氨酰胺由中国科学院上海生物化学研究所
于年采用北疆分离的—株生产,批号:
建立了株杂交瘤细胞株本文报道了株三、饲养层细胞的制备:将小鼠放血致死,无菌
分泌抗病毒北疆株单克隆抗体杂交瘤分离腹部皮肤露出腹膜,腹腔注入. 蔗糖~
轻轻地揉动,约后吸出腹腔渣,经低速离
细胞株的建立及其特性。
心后制成×/细胞悬渣分种于孔细胞培
材料和方法
奉课题由新疆维吾尔自治区卫生厅青年科研基盎资
一
、毒株和免疫方案取北疆株—. 助
年从北疆阜北农场八队捕获的亚洲璃眼搏赫嫂稿日朝:加息
维普资讯
· ·
养板内,每孔.,置培养箱内培琼脂糖上海东海制药厂,批号:,缓冲液为
养,次日使用..
四、细胞融台:参照文献并略有改进。将无菌脂糖后铺板,于每片.×
制取的免疫/鼠睥脏细胞.×和处在. 加待琼脂糖凝固后打孔。周围孔径
对数生长期的/骨髓瘤细胞.× 约,中央孔径为,孔距为。各片中央
混合,离心,弃上清液,将尖底离心管置于孔分别加羊抗鼠及亚类、
水浴中,加.,
内逐滴加完,静止后,缓缓加入无血清将玻板移置湿