基因检测技术比较.pptx

文档介绍：该【基因检测技术比较 】是由【niuww】上传分享，文档一共【21】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【基因检测技术比较 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。基因SNP检测技术比较
基因多态性检测技术:
一DNA测序技术(DNAsequence)
二基因芯片(genemicroarray)技术
三实时定量PCR(RealtimePCR,RT-PCR)技术
一DNA测序技术
从1977年第一代DNA测序技术(Sanger法),发展至今三十多年时间,测序技术已取得了相当大的发展,从第一代到第三代乃至第四代,测序读长从长到短,再从短到长。下面我们就一一介绍前三代测序技术。
第一代测序技术
Sanger法核心原理是:由于ddNTP的2’和3’都不含羟基,其在DNA的合成过程中不能形成磷酸二酯键,因此可以用来中断DNA合成反应。
第二代测序技术
第一代测序技术的主要特点是测序读长可达1000bp,但其测序成本高,通量低严重影响了真正大规模的应用。而经过不断的技术开发和改进,以Roche公司的454技术、illumina公司的Solexa,Hiseq技术和ABI公司的Solid技术为标记的第二代测序技术诞生了。

(1)DNA待测文库
构建
(2)Flowcell
(3)桥式PCR扩增
与变性
(4)测序

(1)DNA文库制备
(2)EmulsionPCR
(3)焦磷酸测序
第三代测序技术
以PacBio公司的SMRT和OxfordNanoporeTechnologies纳米孔单分子测序技术,被称之为第三代测序技术。
PacBioSMRT技术
基本原理:DNA聚合酶和模板结合,4色荧光标记4种碱基(即是dNTP),在碱基配对阶段,不同碱基的加入,会发出不同光,根据光的波长与峰值可判断进入的碱基类型。
OxfordNanoporeTechnologies
当DNA碱基通过纳米孔时,它们使电荷发生变化,从而短暂地影响流过纳米孔的电流强度,灵敏的电子设备检测到这些变化从而鉴定所通过的碱基。