文档介绍：甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因克隆分析及原核表达福建农林大学硕士学位论文学科专业研究方向究指导老师生物化学与分子生物学分子病毒学孟岩许莉萍研究员论文完成时间:二六年四月研生学校编号:学生学号:分类号:密级:.
跏守砒学位。毕业,论文作者亲笔签名:矗形乙洲学位弦论文作者亲笔签名:岛锟卿硼坍口凯、绷石解矿硐沙讶胡日期:劢矽町”⋯独创性声明论文使用授权的说明矽本人声明,所呈交的学位弦论文,是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯他人知识产权的行为,由本人承担应有的责任。本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位弦论文的规定,即学校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密,在年后解密可适用本授权书。不保密,本论文属于不保密。指导教师亲笔签名:期气移、/口
中文摘要甘蔗是世界最重要的糖料作物,蔗糖占我国食糖产量的%以上,同时它也是南方地区生产燃料乙醇的最佳可再生能源作物之一。甘蔗黄叶综合症,鞘澜缂拔夜攴⑾值闹匾2『Γ斐刹肯陆怠品质变劣和种性退化。现在认为,甘蔗黄叶综合症是由甘蔗黄叶病毒琒鸬摹甘蔗黄叶病毒主要危害甘蔗等禾本科作物,是一种由蚜虫持久性传播的单链『义帕2《荆腔浦⒉《究囊桓鲂鲁稍薄8收峄埔恫《就饪蛋白是和蚜虫传播相关的,并且和病毒自身的许多生命活动相关,研究表明该基因转化植物可提高植物抗病性。由于美国系列品种普遍易感该病,系列品种是我国主要亲本,因此急需提高我国自育品种对黄叶综合症的抗性。为此在国家“十五”,本研究采用同源克隆技术,分离甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因,并对其进行序列分析,而后通过原核表达研究该基因所编码的特异蛋白表达情况。结果如下:犹锛洳杉懈收峄埔蹲酆现⒌牟∫叮掷胩崛∑銻。根据已发表的耐饪堑鞍兹蛄猩杓铺匾煨砸铮τ肦狿技术从甘蔗病叶的扩增得到全长约哪康腄片段。厥詹⒋炕媚康钠希寺〉皆靥錺一希H氪蟪Ω司闑写罅糠敝场@冒避星嗝顾厣秆】剐跃洌捎肞和酶切鉴定拟转化子,获得真是转化子。序列分析表明成功获得全长猚颉8没虻目7旁亩框包括龊塑账幔嗦个氨基酸,与已报道的蜃榈暮塑账嵝蛄的同源性为%~%。胮为载体骨架,构建含基因的原核表达载体—,利用卡那霉素和庾;樱竦谜媸底;印肐盏寄康牡鞍椎谋泶铩2捎肏炕康幕蛩泶的带有鯤牡鞍住>璖治霰砻鳎S谢柿狢拇肠杆菌菌株筛咝П泶锔收峄埔兜壳蛋白,基因的表达产物分子量约鞍祝隿蚩7旁亩量蚣艿睦砺弁扑阒喾关键词:甘蔗、甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因、克隆、原核表达
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一前言收峄埔蹲酆现捌洳≡甘蔗黄叶综合症及其危害甘蔗黄叶综合症殖莆8收峄叶病,是一种严重危害甘蔗生长的世界性甘蔗疾病。年热说谝淮报道了年美国夏威夷群岛上大面积出现的有别于营养缺乏的甘蔗黄化现象⋯。之前澳大利亚也报道过类似的异常情况,但是并没有引起人们的重视。现在甘蔗黄叶综合症已经在美国的路易斯安娜州妇⒎鹇蘩锎镏荨住⑾耐闹荨⒌驴巳怪荨以及澳大利亚、毛里求斯陋“臀⒛戏恰⒂《群吐砝啊暗榷喔鍪澜绺收主产区报道此病的发生。年我国广西省南宁市第一次出现甘蔗黄叶综合症类似症状,当时未引起人们的注意⋯,。年,广西省大面积出现甘蔗黄叶综合症类似症状。现今已在我国多个品种上确诊出甘蔗黄叶综合症¨¨。该病是如何传入我国的还不是很清楚。甘蔗花叶病初侵染源主要是带病种蔗和田间病株。田间自然传病的主要媒介是蚜虫,不能通过蔗刀和农事操作的机械方式进行传播。病害发生的轻重同品种抗性、外界环境等因素有密切关系。高温少雨有利蚜虫繁殖活动的天气有利于病害的传播蔓延,蔗田杂草丛生和蔗区存在其他禾本科寄主植物也有利于病害发生。甘蔗黄叶综合症的病症初期症状表现在甘蔗新叶~叮章冻龇屎翊的为第,后期老叶黄化2∫兜牡湫椭⒆次R吨欣呦卤砥ご勇躺ū湮;粕ǎ中肋上表皮仍然是正常的白色或白中带绿、粉红或微红色。但是中肋的粉色并不是不变的,当新叶长出后,中肋最终变成黄色。感病植株中肋的平均锤度要比正常植株高出倍¨引。甘蔗黄叶综合症的会因不同品种的遗传背景不同,而表现出不同特征。夏威夷群岛报道的甘蔗黄叶综合症的症状是:染病植株首先在中肋出现黄化现象,接着叶尖黄化和坏死,并继续向整个叶片扩散,直至整个叶片出现黄化甚至坏死,有的植株叶片中肋上还会出现红色斑点⋯。有一些品种感染甘蔗黄叶综合症后则所有叶片都变黄。一些品种在秋冬季节中肋的黄化向两边蔓延,黄化程度随时间和温度的变化而加重。值得注意的是,甘蔗黄叶综合