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实验二
毛细血管采血(Collectionofcapillaryblood)
白细胞计数(Whitebloodcell)
实验二
[要求]
1、掌握毛细血管采血的方法,了解不同部位采血对检验结果的影响;
2、掌握显微镜WBC计数的原理和方法;
3、熟悉WBC增高和减少的临床意义。
器材与试剂
[器材]
一次性消毒采血针、一次性微量吸管、小试管、75%(V/V)乙醇棉球、无菌干棉球。
[试剂]
白细胞稀释液(2%冰醋酸中加入10g/L结晶紫或亚甲兰3滴)
操作
1、实验准备
3、消毒,待干
2、按摩左手食指或中指
4、针刺(深度2-3mm)
5、拭血(第一滴血)
7、稀释(擦去吸管外余血、冲洗次2-3次)
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6、吸血(20ul)
注意事项
1、采血部位皮肤应完整,无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。除特殊情况外,不要在耳垂采血。半岁以下婴幼儿由于手指小,可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采血;严重烧伤者可选皮肤完整处采血
2、必须严格按无菌技术操作,防止采血部位感染;做到一人一针一管,避免交叉感染,
注意事项
4、第1滴血混有组织液,应擦去。如血流不畅切勿用力挤压,以免造成组织液混入,影响结果的准确性。
5、在进行多项检查时,采集血液标本的顺序是PLT→RBC→Hb→WBC计数与分类。
原理
用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。
二、WBC计数
操作
1、
2、吸取血液20ul
3、混匀、悬液变为棕褐色
4、充池,静止2-3min
5、计数(四角4个大方格)图示
6、计算、出报告
注意事项
1、充池时,如充液不足、液体外溢、断续充液,或产生气泡、充液后移动盖玻片等,均会使细胞分布不均匀,造成计数结果不准确,应重新充池。一般情况下各大方格间的细胞数相差不超过10%。若相差太大,应重新充池。
2、白细胞数量过多时,可采用加大稀释倍数的方法。;数量过少时,可采用扩大计数域的方法,如计数8个或9个大方格;也可采用减少稀释倍数的方法