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植物病理学报
水稻白叶枯病菌鸡卵黄抗体的
制备及其初步应用
许志刚刘凤权易建平
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撮要通过免疫产蛋母鸡制备了针对水稻自叶枯病菌菌株一的卵黄抗体,比较了一种中草药佐
刺和福氏佐剂对抗体产生和效价的影响。结果表明:与福氏佐剂相比,中草药佐剂对免疫母鸡的生活力和
蛋影响较小,母鸡恢复产蛋较早免疫后天。卵黄中抗体出现后,两种佐剂处理的抗体都能在抗体出
现后天达到较高效价并维持较高效价达十月以上。卵黄抗体经方法提纯后可得到比较纯净的
。提纯的蛋白含量平均为./,双扩散效价为:将卵黄抗体作为包被抗
体用于异动物抗体双夹心可有效地检测水稻病叶病种上的自叶枯病菌,其检测灵戢度为/
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关键词: 皂赛苗蔓垫焦型重兰查王堕逊
家禽对抗原刺激在细胞和体液中都能产生免疫应答,并能通过卵黄将抗体传给下一代。与哺乳
动物相比,母鸡饲养容易,鸡蛋的收集也比采血简便。因而自从以色列人,首次用
母鸡制备抗体以来,已有许多通过免疫母鸡制备卵黄抗体的报道,尤其是植物病毒卵黄抗体的制
备,并将制备的抗体用于植物病毒的鉴定和检测工作中”。本文报道了水稻白叶枯病菌卵黄抗

, 体的制备和初步应用,并比较了一种中草药佐剂和福氏佐剂对卵黄抗体的产生和效价的影响。
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, 珀
, 材料和方法
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. 免疫原
戊二醛固定的水稻白叶枯病菌株一菌体细胞,免疫用菌液浓度为/。
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. 供试母鸡
选用当年刚产蛋的“罗曼系”健康母鸡只,供免疫用。每只鸡平均一周产蛋枚,每枚蛋平均
含卵黄。
. 佐剂
福氏完全佐剂和不完全佐剂均为美国产品,免疫前先与等量的菌体细胞液混合,并充分
乳化。中草药佐剂由本校中兽医教研组制备,其主要成份为具有双向免疫调节功能的黄酮和多糖类
物质国家自然科学基金资助课题,免疫时先与倍体积的菌体细胞液混合。
. 免疫
只鸡分两个处理,分别用上述二种佐剂与适量菌体抗原混合后免疫。每个处理各注射两次,
· 本课鼯为高校博士点专项科研基金资助项目
修改稿收到日期:
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植物病理学报卷
菌体细胞波均为,同为大腿肌肉或胸肌注射。第一次注射后周抗体效价有所降低时进行
第二次注射。使用福氏佐剂的处理,第一次用福氏完全佐剂,第二次用不完全佐剂。
. 卵黄抗体效价测定
及时慢集两个处理所产鸡蛋,大头朝上竖立放于蛋架上,并置于℃冰箱中。
壳表面用新洁尔灭消毒,。每个卵黄经奥氏双扩散测定抗体效价后,
两个处理各按不同效价汇集,供提取用。
. 卵黄抗体的提取
将各处理效价相同的个鸡蛋蛋黄合并供一次提取,用沉淀法提取卵黄抗体:,提
取工作在室温下进行。其步骤为:量取卵黄液,加倍体积的.,..用玻棒搅匀;
纱布过滤,滤液加,使终浓度为. ,搅拌后,转/分离心,
弃沉淀;上清液中加,使终浓度为. ,搅拌至溶解,转/分离心·弃上
清;沉淀用/原卵黄体积的溶解。
卵黄抗体的