电化学原理.ppt

文档介绍：电化学发光免疫分析法介绍
亚洲心脏病医院检验科
刘泽金
免疫学基本概念
免疫标记技术
用放射性元素、荧光素、酶、发光底物标记抗原或抗体,与标本中的相应抗体或抗原反应,通过测定带有标记物的抗原抗体复合物,来间接测定标本中的抗体或抗原。标记物的放大效应可以极大提高反应的灵敏度。
Ag
A b
标记物
免疫学检验三大历程碑
放射免疫分析法(RIA)
是指用放射性同位素标记已知的抗原或抗体来测定未知的抗体或抗原的技术。

缺点:
半衰期短,试剂不稳定
反应时间长,操作难以自动化。
使用放射性核素,对人体有一定的危害性。
标记物半半衰期短,试剂货架期不长。衰期短,试剂货架期不长。不断变化,试剂批间、批内变化大,标准曲线不能保存。
60年代
70年代
酶联免疫吸附测定方法(ELISA)基本原理:
缺点
包被不均一
操作步骤复杂,耗时长,难以自动化
结果重复性不好
线性范围窄
80年代

化学发光免疫测定法(CLIA)
是以化学发光剂、催化发光酶或间接物质标记抗体或抗原,当标记抗体或抗原与相应的抗原或抗体结合后,加入氧化剂或者发光底物,使反应体系发光,用发光光度计进行检测。
缺点
标记物易裂变,试剂不稳定
闪烁性发光,光信号不稳定
90年代最新技术
电化学发光免疫测定(ECL)技术原理:
用二价的三***联吡啶钌[Rubpy3]2+标记抗原或抗体,与标本中的抗体或抗原结合,然后在电场的作用下发生电化学发光反应,产生的光强度与标本中代测物质的浓度成线性关系。
电极表面的ECL反应
试剂盒实样